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目的:本实验通过针刺曲池穴(L11),血海穴(SP10),足三里穴(ST36)对荨麻疹模型小鼠(I型变态反应模型)肥大细胞脱颗粒过程中磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路表达的变化、血清免疫球蛋白E(Ig E)水平变化的比较研究,探讨针刺调控荨麻疹的有效性及其形态学和分子生物学作用机制。材料与方法:本实验选用8周龄雄性ICR小鼠共40只,体重为20-25g。采用随机数字表法进行分组,分为正常对照组,模型对照组,针刺组(曲池,血海,足三里)与阳性药物组,每组各10只。造模方法采用小鼠被动皮肤过敏试验(PCA)的方法建立荨麻疹模型小鼠。针刺组选择小鼠曲池穴,血海穴,足三里穴进行针刺干预;阳性药物组给予氯雷他定0.2mg灌胃,两组共治疗7天。第8天开始建立被动皮肤过敏反应模型,将小鼠用乙醚麻醉,除空白组外,其他三组给予小鼠右耳皮内注射含0.5%抗DNP-Ig E的磷酸盐溶液0.1ml,空白组给予相同位置皮内注射0.9%氯化钠溶液0.1ml进行对照。48小时后四组进行抗原攻击,采用尾静脉注射含DNP-HSA 0.5μg/μl和1%伊文思蓝的0.9%磷酸盐溶液200μl。造模成功以后取小鼠腹主动脉血和耳部致敏部位的皮肤组织。检测指标:(1)采用HE染色法检测小鼠致敏部位的皮肤组织形态学变化。(2)采用ELISA法检测血清总Ig E水平的变化。(3)采用免疫组化法观察小鼠PI3K/P-PI3K,AKT/P-AKT蛋白表达的水平并进行统计分析。结果:1.各组小鼠致敏部位的皮肤组织HE染色检测结果正常对照组小鼠皮肤组织表皮、真皮的镜下结构和形态完好,厚度正常,细胞排列有序,结构清晰,并未见水肿。模型对照组的皮肤组织表皮、真皮的镜下结构见严重水肿和炎症的现象,表皮内见严重角化,颗粒层增厚,基底层的细胞破坏,真皮内有各种炎症细胞浸润,细胞间的界线不清楚。阳性药物组小鼠皮肤组织的表皮、真皮的镜下结构见轻微增厚,角质层见轻度角化,细胞间的界线较为清晰,结构基本完整,显示了轻度水肿和炎症反应。针刺组的结构无明显破坏和水肿现象,改善了病变区皮肤组织的炎性浸润并恢复组织的结构形态。2.各组小鼠血清中总Ig E水平的检测结果模型对照组的小鼠血清中总Ig E水平比正常对照组的水平显著高(P<0.05),说明荨麻疹小鼠模型的(I型超敏反应)造模成功。针刺组和阳性药物组的小鼠血清中总Ig E的水平低于模型对照组的总Ig E水平(P<0.05)。针刺组与阳性药物相比较,阳性药物组的血清中总Ig E的水平低于针刺组的总Ig E水平(P<0.05)。3.各组小鼠致敏部位组织中PI3K,P-PI3K,AKT,P-AKT蛋白表达检测结果模型对照组小鼠PI3K,P-PI3K,AKT,P-AKT的蛋白表达水平比正常对照组的水平相当高(P<0.05)。针刺组和阳性药物组小鼠PI3K,P-PI3K,AKT,P-AKT的蛋白表达水平低于模型对照组,两组与模型对照组的PI3K无统计学意义,P-PI3K,AKT,P-AKT有统计学意义(P<0.05)。针刺组与阳性药物组相比较,阳性药物组小鼠PI3K,P-PI3K,AKT,P-AKT的蛋白表达水平低于针刺组,P-PI3K,AKT,P-AKT有统计学意义(P<0.05)。结论:1.针刺曲池,血海,足三里穴可以抑制小鼠血清中总Ig E的水平,表明针刺可以通过抑制I型超敏反应程度,实现治疗荨麻疹的作用。2.针刺曲池,血海,足三里穴可以调控PI3K/AKT信号通路,并通过抑制PI3K和AKT的磷酸化,进而抑制PI3K/AKT信号通路引起的肥大细胞颗粒释放炎性介质,证明针刺可通过调控PI3K/AKT信号通路起到治疗荨麻疹的作用。