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基于开发抗疲劳、耐缺氧保健食品的需要,本论文选用蜂蜡为原料,通过对蜂蜡进行皂化释放二十八烷醇、溶剂萃取高级脂肪醇混合物,结晶纯化二十八烷醇等工艺,制备出纯度为22.44%、33.72%和41.86%的三种二十八烷醇产品。本实验对二十八烷醇的制备工艺进行了研究,确定了每个单元操作的最佳工艺参数。并且本文将这三个纯度的二十八烷醇产品作为受试物,从动物行为学和生化指标的变化,来研究其抗疲劳、耐缺氧作用和检验其功效与二十八烷醇产品纯度是否具有相关性。结果表明: (1) 原料粗蜂蜡精制后的得率为91.13%,精制蜂蜡的熔点为63~69℃,皂化值为107.77mgKOH/g。 (2) 确定了蜂蜡皂化释放二十八烷醇过程中,皂化时间、皂化温度、KOH过量值及蜡醇比四个因素对皂化效果的影响。结果表明,随着皂化时间的延长、KOH过量值的增大和蜡醇比的增大,皂化率逐渐提高;随着皂化温度升高,皂化率先提高后降低。蜂蜡皂化释放二十八烷醇的最佳皂化工艺条件为皂化时间4h,皂化温度为90℃,KOH过量值48.39%,蜡醇比6:15,在此工艺条件下皂化率为93.97%。 (3) 确定了钙化反应的操作工艺及参数:向皂化产物中加入相当于皂化用KOH一半摩尔数的2mol/L的CaCl2乙醇溶液(即每克精制蜂蜡得到的皂化产物中加入2mol/L的CaCl2乙醇溶液0.7mL),在90℃下进行钙化反应2h后,停止加热,冷却到室温,抽滤,滤饼用蒸馏水反复洗涤,于60℃烘干获得钙化产物(主要成分为高级脂肪酸钙与高级脂肪醇,1.31g钙化物/g精制蜂蜡)。 (4) 确定了萃取高级脂肪醇混合物的最佳条件为:以丙酮为溶剂,萃取温度为65℃,固液比为30/250(g/mL),萃取时间为11h,高级脂肪醇混合物(后称A)得率为36.27%(相对于精制蜂蜡)。 (5) 确定了纯化二十八烷醇的最佳结晶条件:以乙酸乙酯/正己烷(体积比为4:1)为结晶溶剂,料液比为1:25(g:mL),结晶温度为35℃,每次结晶时间为24h。在此结晶条件下对A进行三次结晶得到晶体B,其得率为33.36%(相对于A);对A进行六次结晶得到晶体C,其得率为12.54%(相对于A)。A、B、C中二十八烷醇含量分别为22.44%、33.72%和41.86%。