沉默Glypican-3基因增强人肝癌细胞HepG2对化疗药物至凋亡作用的敏感性

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Glypican-3(GPC3)为膜性硫酸乙酰肝素多糖蛋白,通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)结合于细胞表面,是硫酸类肝素糖蛋白聚糖(glypican)家族成员。现已发现在肝癌细胞中高度表达并参与其发生发展。   目的:   沉默人肝癌细胞HepG2的GPC3基因表达,观察其对5-氟尿嘧啶(5-FU)和顺铂(CDDP)的药物敏感性及细胞凋亡情况的影响。   方法:   1.构建干扰GPC3的shRNA载体,将其转染至肝癌细胞,并设立对照组。   2.Western blot测定GPC3蛋白表达情况。   3.利用MTT法测定转染后肝癌细胞对5-FU及顺铂的药物敏感性。   4.采用流式细胞技术观察转染后肝癌细胞在5-FU及顺铂作用下的细胞凋亡情况。   结果:   转染shRNA的肝癌细胞其GPC3表达阴性;其对5-FU及顺铂的药物敏感性增加(P<0.05);细胞凋亡较对照组增加(P<0.05)。   结论:   GPC3的高表达在肝癌细胞中起到抗凋亡作用,而下调GPC3可作为一个潜在的靶目标,增加肝癌细胞对化疗药物诱导细胞凋亡的敏感性。
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