辽宁碱蓬甜菜碱和甜菜碱醛脱氢酶的研究

来源 :大连理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:setsail2008
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许多高等植物在受到水/盐胁迫时体内积累大量的甜菜碱。甜菜碱是一种非毒性的渗透调节物质,它能够增强细胞质的渗透调节能力,而不影响细胞的生理机能,其积累水平与植物的抗逆性强弱呈正比。甜菜碱醛脱氢酶是合成甜菜碱过程中的一种关键性酶,它通过催化甜菜碱醛最终合成甜菜碱。本文对抗盐碱能力很强的盐生植物野生辽宁碱蓬(wild Suaeda liaotungensis)中的甜菜碱和甜菜碱醛脱氢酶进行了较系统的研究。 通过比色法测得辽宁碱蓬叶片中的甜菜碱含量为9.55mg/100g,与目前已测得甜菜碱含量的其它盐生植物相比,辽宁碱蓬属于高含甜菜碱植物,因而从机理上解释了辽宁碱蓬耐盐能力很强的原因。 通过酶活定位法确定甜菜碱醛脱氢酶主要存在于其叶片细胞的胞液和叶绿体中,分配比例大约为60%在胞液中,40%在叶绿体中。 通过硫酸铵分级沉淀、离子交换层析和凝胶过滤层析相结合的方法将辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶分离纯化为电泳纯,纯化倍数为206倍,比活达到2363nmol/min.mg。 辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶的单个亚基的分子量为64.5kD,分子量为129kD,表明其为具有两个相同亚基的同源二聚体。其等电点pI为5.70,最佳pH值为7.80,最适温度为30℃。在25℃和pH8.0反应条件下,对于甜菜碱醛而言,米氏常数Km为67.7μmol/L,最大反应速率Vmax为78.9μmol/min。另外,本文还就K+、Na+、Ca2+和Mg2+对辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶活性的影响进行了研究。
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