【摘 要】
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研究背景:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,我国乳腺癌的发病人数及死亡人数均位于世界前列,且近年来呈逐渐上升的趋势。随着医疗水平的提高,乳腺癌的检出率提高,治疗方法也不断增多,但仍有很多患者因发现晚、治疗效果差死亡。所以我们需要寻找更敏感的检出手段、更精准的预测指标及新的治疗方法,帮助我们解决乳腺癌诊疗过程中遇到的困难。FSIP1（fibrous sheath interacting protein
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研究背景:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,我国乳腺癌的发病人数及死亡人数均位于世界前列,且近年来呈逐渐上升的趋势。随着医疗水平的提高,乳腺癌的检出率提高,治疗方法也不断增多,但仍有很多患者因发现晚、治疗效果差死亡。所以我们需要寻找更敏感的检出手段、更精准的预测指标及新的治疗方法,帮助我们解决乳腺癌诊疗过程中遇到的困难。FSIP1（fibrous sheath interacting protein 1）是近年来新发现的一种癌-睾丸抗原（cancer-testis antigens,CTA）,限制性表达于生殖细胞及多种癌细胞中,已经被证明在膀胱癌、肺癌、乳腺癌中高表达,并与恶性肿瘤的发生发展具有一定关系。不同肿瘤中癌睾丸抗原的表达不同,同一类的肿瘤可能表达多种不同癌睾丸抗原,而同一种癌睾丸抗原在同一类肿瘤的不同分型中的表达也不同。FSIP1在乳腺癌中的表达已经被证明与激素受体的状态及Her2的表达等有一定关系,但关于不同分子分型的乳腺癌中FSIP1的表达情况的研究尚少。研究目的:探讨FSIP1蛋白在乳腺癌中不同分子亚型中的表达情况,分析FSIP1的表达水平与乳腺癌患者临床病理学特征的关系,测定FSIP1高表达对乳腺癌患者生存及预后的影响。此外,进一步研究了FSIP1对Her2+、ER+及PR+乳腺癌BT474细胞株增殖、侵袭及迁移的影响。研究方法:（1）将购买的140例乳腺癌患者的组织芯片,通过免疫组织化学方法检测FSIP1的表达情况,采用SPSS统计软件及Graph Pad prism绘图软件进一步分析FSIP1的表达与这些患者的临床病理学特征的关系,及FSIP1在乳腺癌不同分子分型中的表达情况。（2）通过Western blot实验检测多种乳腺癌细胞株中FSIP1的表达情况,选取FSIP1表达较高的Her2+、ER+及PR+的BT474细胞系,利用si RNA瞬时转染技术,将si-FSIP1（实验组）及si-NC（对照组）分别转染至BT474细胞中。（3）通过划痕实验检测沉默FSIP1基因的实验组及对照组BT474细胞的迁移情况。（4）应用MTT方法检测两组乳腺癌细胞的增殖情况。（5）通过transwell实验验证两组BT474细胞的侵袭情况。实验结果:1.FSIP1在乳腺癌组织中主要表达于肿瘤细胞,在间质细胞中也有表达。2.FSIP1在乳腺癌患者中的高表达比率为48.84%。3.乳腺癌患者肿瘤细胞中FSIP1的表达与ER（p=0.011）、PR（p=0.022）状态及疾病复发（p=0.01）有关,与年龄（p=0.44）、肿瘤的大小（p=0.796）、Her2的状态（p=0.120）、疾病的分期（p=0.122）及有无淋巴结转移（p=0.255）无关;而间质细胞中FSIP1的表达仅与疾病复发有关。4.肿瘤细胞中FSIP1的表达在单因素及多因素分析中均影响患者的无进展生存时间及总的生存时间,且FSIP1高表达的患者较FSIP1低表达的患者生存率差。5.激素受体阳性的乳腺癌患者FSIP1的表达,明显高于三阴乳腺癌患者中FSIP1的表达水平（P<0.05）。6.在几种不同细胞系中,Her2+、ER+、PR+的BT474细胞中FSIP1表达水平最高。7.将si-NC及si-FSIP1转染入BT474细胞中,与si-NC组比较,转染si RNA组细胞增殖、侵袭及迁移能力降低。实验结论:1.肿瘤细胞中FSIP1的表达与乳腺癌患者激素受体的状态有关,与Her2的情况、淋巴结转移、分期、年龄、肿瘤的大小等无关。2.FSIP1高表达患者更易出现复发,肿瘤细胞中FSIP1高表达在乳腺癌中可作为一个独立的不良预后因素;3.FSIP1在不同分子亚型的乳腺癌患者中表达不同,在激素受体阳性乳腺癌患者中表达较高,在三阴乳腺癌中表达最低。4.沉默了FSIP1基因,可抑制BT474细胞的增殖、侵袭及迁移,提示FSIP1可能通过某种机制影响BT474细胞的生物学行为。
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