小果型西瓜离体培养关键技术及四倍体诱导研究

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西瓜味甜多汁,是祛暑降温的上等果品,有“夏季水果之王”的美誉,在国民经济中占有重要地位。西瓜的种植面积和产量在世界十大水果中仅次于葡萄、香蕉、柑橘和苹果,居第五位。本试验以小果型西瓜优良自交系(048、MH-39-1、032、028-5-5、047-1)为材料,首先对小果型西瓜再生体系进行优化,其次,利用诱变剂秋水仙素和新型诱变剂胺磺灵(Oryzalin)对子叶近胚轴端进行离体诱变,研究基因型、诱变剂浓度、处理时间及处理方式对小果型西瓜四倍体的诱变效果,并对再生植株进行倍性鉴定、驯化移栽,获得了较高的四倍体诱导率及优良的四倍体小果型材料,为今后三倍体小果型西瓜的高效、快速育种提供了参考依据。研究结果如下:1、离体培养关键技术研究试验材料的无菌苗获得以在28℃条件下,先暗培养3天,待胚根长到0.5cm左右时转到光下培养较为适宜;但基因型不同,其成熟种胚萌发率也不同,048基因型的种胚萌发率最高,为98.5%。不定芽诱导的外植体以3-5d苗龄的子叶近胚轴端为宜,最佳培养基为MS+6-BA2.0mg/L。基因型对不定芽的诱导有一定影响,047-1基因型的不定芽诱导率最高,为92.5%。B(1/2MS+IBA0.3mg/L)、L(1/2MS,Fe3+不变+0.2IAAmg/L)是较理想的生根培养基,二者的生根率和根条数分别为79.3%,4.5条;80.0%,5.5条。2、秋水仙素诱导西瓜四倍体小果型西瓜基因型不同,秋水仙素浓度及处理时间不同,四倍体诱导率差异较大。048、MH-39-1、028-5-5三个基因型均能诱导获得四倍体,不同基因型所需秋水仙素的处理时间及浓度不同,其中048于400 mg/L秋水仙素处理36h,四倍体诱导率最高,达30.8%。3、Oryzalin诱导西瓜四倍体基因型不同,浓度不同,处理时间不同,处理方式不同,四倍体诱导率有较大差异。采用液体培养诱导小果型西瓜四倍体的诱导率(14.96%)显著高于固体培养(4.0%),处理时间为4d较适宜。048、032、047-1三个基因型小果型西瓜材料的四倍体诱导率差异性不显著,但是以032基因型采用Oryzalin50mg/L处理48h,四倍体诱导率最高,为33.3%。4、小果型西瓜四倍体鉴定试验采用形态学、叶绿体计数法和根尖染色体计数法进行倍性鉴定方法比较,结果表明,叶绿体计数法与根尖染色体计数法的吻合率为90.8%,说明叶绿体计数法是可靠的,而且该方法操作较简单。5、田间性状观察比较田间二、四倍体(048)小果型西瓜再生植株的平均叶长、平均叶宽、叶形指数均达到极显著水平,而茎粗度差异性不显著。
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