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目的慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)急变期的治疗是目前的重要问题,临床上亟需要找到新的分子治疗靶点。本研究意欲通过使用生物信息学方法分析CML基因表达谱数据并进行实验验证,找到对CML急变期白血病细胞起作用的潜在治疗靶点。方法本实验总共分为三个部分:1.使用基因集群富集分析软件(gene set enrichment analysis,GSEA)分析基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)中CML临床样本及小鼠细胞模型的基因表达谱数据,获得与CML急变期相关的基因集群,然后从中选择丝氨酸蛋白酶抑制剂家族成员B2(SERPINB2)作为研究对象。2.应用分子克隆技术在空载质粒p Adtrack-CMV的基础上构建p Adtrack-CMV-SERPINB2重组质粒,使用电穿孔方法将上述质粒分别转入CML急变细胞系K562细胞。运用细胞免疫荧光技术检测SERPINB2在细胞内的表达与分布。3.p Adtrack-CMV-SERPINB2重组质粒转染白血病K562细胞后,采用CCK-8实验和克隆形成实验检测细胞增殖和克隆形成能力,使用流式细胞术检测细胞周期,通过Western blot实验检测SERPINB2、BCR/ABL以及RB1的表达。结果1.使用GSEA软件分析,成功获取了CML急变期差异基因集群热力图以及富集信号通路。2.应用分子克隆技术以及电穿孔转染质粒的方法,成功构建了重组质粒p Adtrack-CMV-SERPINB2并转入K562细胞,转染效率在24小时达到75%,细胞免疫荧光实验显示SERPINB2在细胞中成功表达并主要在细胞浆中分布。3.与对照组相比,在K562细胞中过表达SERPINB2可抑制K562细胞的增殖(p<0.001),明显降低K562细胞的克隆形成能力(p<0.01)并导致G0/G1期的细胞比例增多(p<0.001)。蛋白质免疫印迹实验显示BCR/ABL表达无明显变化,SERPINB2、RB1表达水平增高。结论综上所述,SERPINB2可通过上调细胞内RB1的水平,使细胞周期更多的停留在G1期,从而对K562细胞的增殖与克隆形成能力产生抑制作用。