论文部分内容阅读
红皮云杉(Picea koraiensis)为松科云杉属常绿乔木,其球果鳞片中富含多酚类物质。多酚类化合物(Polyphenol compounds)作为天然产物的一种,广泛存在于植物的皮、根、叶、果中,其含量仅次于纤维素、半纤维素和木质素,是日常饮食中最丰富的水溶性抗氧化剂和最具活性的抗氧化物质。膳食中的抗氧化剂可以激发细胞防御抗氧化伤害并保护细胞组件。本实验以红皮云杉球果中主要抗氧化物质为研究对象,用大孔树脂分离纯化并分级,对不同级分做体外抗氧化能力的比较分析,通过平均加权法,选出优势样品,进一步做辅助降血脂和降血糖功能的研究。具体研究结果如下:1.采用超声波辅助提取方法用不同浓度乙醇提取红皮云杉球果中的抗氧化物质,分离纯化,并对各组分进行体外抗氧化能力研究。通过对羟基自由基清除活性、DPPH自由基清除活性、总还原力和抗脂质过氧化能力的比较得出结论:PT40%-E的羟基自由基清除活性最好,清除率可达98.00%,IC50值为119.1Oμg·mL-1,其次为PT60%-D和PT80%-D;PT20%-D对DPPH自由基的清除活性最好,清除率及IC50分别为99.68%和9.01μg·mL-1,其次为PT40%-D、PT60%-D和PT80%-D; PT80%-D总还原力最好,当浓度为300μg-mL-1寸吸光度值达2.21,其次为PT60%-D; PT40%-D在抗脂质过氧化能力方面表现突出,抑制率为99.15%,IC50为271.87μg·mL-1,其次为PT60%-E(?)PT80%-D。多酚、原花青素、黄酮类物质含量与抗氧化指标的相关性分析说明,多酚类物质在抗氧化作用中起到了主要作用。加权平均法对不同样品进行综合比较,得PT80%-D为抗氧化的优势样品,并设其为PB。2.用脂代谢紊乱模型测试PB在辅助降血脂功能上的作用,动物实验结果表明:受试物在辅助降血脂功能、辅助降低甘油三酯、辅助降低血清总胆固醇方面动物实验结果均为阳性。高剂量的红皮云杉球果多酚可以极显著的缓解体重的上升,通过提高脾脏指数提高免疫能力,低剂量下可以极显著的降低高脂模型小鼠血清中糖化血清蛋白含量,中高剂量均能极显著的缓解脂蛋白酯酶和肝酯酶活性的降低。在抗氧化方面,对于血清和肝脏中SOD和GSH-PX活性、MDA和GSH含量的测定可以看出,在血清中各剂量红皮云杉球果多酚均有显著效果,在肝脏中,低剂量下可显著缓解SOD活性的下降、中高剂量下可缓解GSH含量和GSH-PX舌力的下降、各剂量下均能使MDA上升趋势有显著减缓。由此看出,PT80%-D对高脂小鼠的脂代谢紊乱方面和抗氧化方面均有显著效果。3.通过对小鼠腹腔注射四氧嘧啶的方法,建立实验型糖尿病模型,再给予受试样品PB。动物实验结构表明:PB对降空腹血糖实验和糖耐量实验结果均为阳性,有辅助治疗糖尿病的作用。各剂量组均能提高小鼠的存活率,中高剂量对改善小鼠体重增长缓慢方面有显著作用;各剂量均能使肝脏指数降低,中剂量下GSP显著下降;在疲劳方面,低剂量可以显著使肝糖原升高,各剂量均可以极显著的缓解肌糖原的下降;中低剂量下可一定程度降低LD含量,各剂量下均可缓解LDH活力的上升。在脂代谢方面,对降低血清和肝脏中TC和TG含量均有阳性作用,并且中高剂量下可显著缓解LDL-C的升高。抗氧化方面,高剂量的受试物可以使肝脏、肾脏和心脏中SOD活力升高、MDA含量降低,使血清和肾脏中GSH含量升高;中剂量的受试物可以使肝脏中的SOD活性上升,血清、肝脏和肾脏中MDA含量下降,肾脏和心脏中GSH-PX活性上升;低剂量的受试物可以使肝脏中SOD活性上升,肾脏中MDA含量下降,脑中GSH含量上升,并促进肾脏和心脏中GSH-PX活性。所以,PB在治疗糖尿病方面有阳性效果,能提高小鼠的存活率,调节糖代谢和脂代谢方面的紊乱,提高小鼠体内抗氧化能力,并起到显著的抗疲劳作用。·本文通过对红皮云杉球果中抗氧化物质的分离、纯化及不同级分抗氧化研究,发现PB(80%浓度乙醇提取物经纯化后2800ml-3100ml段)在各体外抗氧化功能上表现最好。创新性的对其降血脂和降血糖功能进行研究,发现PB对高脂饲料诱导的高血脂小鼠具有良好的降血脂和抗氧化功能,对糖尿病小鼠糖代谢、脂代谢、抗氧化和抗疲劳方面有显著效果。