论文部分内容阅读
黄花乌头[Aconitum Coreanum(Levl.) Rapaics]系毛茛科(Ranuculaceae)乌头属(Aconitum L.)植物,具有祛风除湿、温经止痛之功效。目前,黄花乌头块根内含有的叔胺类二萜生物碱—关附甲素(Guanfu base A),具有显著的抗心律失常作用,已被开发成我国的原创一类新药,即盐酸关附甲素注射液。本文以黄花乌头发根为研究对象,采用高压脉冲电场法、渗漉法、超声法、乙醇加热回流法、溶剂萃取法、大孔树脂吸附树脂法、阳离子交换树脂法、酸性染料比色法、LC-MS等方法,对黄花乌头发根中的盐酸关附甲素进行提取、分离、定性及定量,并对盐酸关附甲素中试生产工艺进行了试验,取得了如下研究结果:1.通过高压脉冲电场法、渗漉法、超声法及乙醇加热回流法对黄花乌头发根总生物碱进行提取,结果表明:高压脉冲电场法提取关附甲素的效率最高,为3.91‰,浸膏得率也较高,为39.32%,同时提取时间短,无需高温,可以避免活性成份结构被破坏;并对高压脉冲电场法进行正交优化试验,得出其最佳工艺条件为:以90%乙醇为提取溶剂,电场强度20kV·cm-1,脉冲数为8,料液比1:14。2.采用酸性燃料比色法测定了黄花乌头发根中的总生物碱含量,得出最佳测定条件为:在波长为410nm处,以溴麝香草酚蓝为显色酸性染料,用量2mL,调缓冲液pH值为8.0,用量5mL;盐酸关附甲素在8.7μg·m L-143.3μg·mL-1范围内线性关系良好y=0.0459x-0.0126(r=0.9911),平均加样回收率为98.8%(RSD=0.516%);采用高效液相色谱法测定了黄花乌头发根中关附甲素的含量,结果表明盐酸关附甲素在0.10μL1.00μL范围内呈良好的线性关系良好y=15.97x-1.7241(r=0.9924),平均加样回收率为100.86%(RSD=0.96%)。3.对黄花乌头发根关附甲素分离与纯化进行研究,结果表明:与大孔树脂吸附法和离子交换树脂法相比较,以甲基叔丁基醚为主要提取剂的萃取法,工艺简单,成本低,使用酸碱水溶液量少,不易乳化,生产周期短,关附甲素提取得率为2‰,适用于工业化大生产。4.用黄花乌头块根来代替黄花乌头发根进行中试提取试验,结果表明:以高压脉冲电场法进行总生物碱的提取,以甲基叔丁基醚为主要提取剂进行盐酸关附甲素的精制的工艺稳定可行,从而确定其产业化可行性。