石蒜中加兰他敏的微波辅助提取、分离和分析的研究

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该文系统研究了微波辅助提取石蒜中的加兰他敏,建立了加兰他敏的分析方法,利用离子交换树脂法(IEC)初步分离纯化了石蒜提取液,主要研究内容如下:1介绍了石蒜、加兰他敏及加兰他敏的分析方法,比较了传统和现代的生物碱提取及分离纯化方法,综述了微波辅助提取的原理、特点、装置及应用.2建立了密闭微波辅助提取—气相色谱—质谱联用(PMAE/GC-MS)和密闭微波辅助提取—反相高效液相色谱联用(PMAE/HPLC)分析石蒜中加兰他敏的方法.以甲醇为提取溶剂,采用正交设计优化了影响PMAE的因素,优化的条件为:颗粒度40~60 mesh、溶剂体积20 mL、提取温度85℃和提取时间5 min.与溶剂回流法相比,PMAE省时、操作简便.PMAE/GC-MS方法的线性范围为10~100 μg/mL,检出限为3.42μg/mL,回收率为99.3%,RSD为4.4%;PMAE/HPLC方法的线性范围为0.5~100 μg/mL,检出限为0.08μg/mL,回收率为99.5%,RSD为4.1%.用PMAE/GC-MS法定性分析了石蒜提取液,鉴定出16种成分,主要是有机酸、甾醇和生物碱.石蒜提取液净化后用GC/MS鉴定出9种生物碱.3研究了微波破壁—溶剂回流法(MIPRH)提取石蒜中加兰他敏的方法.采用工业上最常用的95%乙醇作为回流提取溶剂,系统研究了影响MIPRH的因素,优化的条件为:样品颗粒度40~60 mesh、样品浸泡时间15 min、微波功率450 W、辐射时间0.5 min、回流固液比1:7和回流时间15 min.与溶剂回流法相比,MIPRH的提取率是溶剂回流法的1.3倍以上,而时间和溶剂用量分别是溶剂回流法的八分之一和70%.石蒜样品量放大十倍后,结果相似,说明MIPRH省时、高效,具有实际应用的前景.实验还发现加兰他敏的含量受石蒜的产地、采集时间和干燥方式的影响较大,而受石蒜存贮时间影响不大.4初步研究了IEC分离纯化石蒜提取液中加兰他敏的方法.以性质最相近的加兰他敏和力可拉敏为对象,用静态法研究了6种阳离子交换树脂对石蒜生物碱的交换吸附和解吸过程.吸附实验发现酸性条件下Amberlite CG-120树脂(1#)和碱性条件下国产CG树脂(3#)的吸附效果较好;解吸实验发现1.0 mol/L的NH3.H2O和1.0 mol/L的HC1分别对酸性条件下吸附在1#树脂及碱性条件下吸附在3#树脂上加兰他敏的解吸效果最好.用动态法研究了Paramaics树脂(0#)、1#树脂和3#树脂分离纯化石蒜提取液的效果,选择2种方式进行洗脱,用薄层色谱法检测,结果表明0#树脂洗脱条件温和,洗脱较完全,分离效果较好.该工作还有待于深入.
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