枣是枣属（ziziphus Mill）植物，是我国重要的经济树种。枣树中存在枣花小、人工去雄授粉困难、坐果率低，大多不含种仁、且胚败育现象严重等因素。同时，枣树在生产上虫害严重，严重制约着枣产业的发展。传统的育种方法很难得到杂种后代，基因工程已成为改良育种的有效手段。本研究选用鲜食枣品种——蜂蜜罐。以蜂蜜罐不同外植体（叶片、子叶、茎段、上胚轴切段、下胚轴切段、根）为试材，建立枣不同外植体再生体系，为枣遗传转化研究奠定基础；另外，以蜂蜜罐实生苗叶片为外植体，通过农杆菌介导法将进行Bt基因遗传转化研究，并对pBar13-Cry2A*和pBar13-Cry1C*进行植物载体改造，以期获得枣抗虫新种质。主要试验结果如下：1.蜂蜜罐不同外植体再生体系的建立（1）胚培养：种胚在WPM+GA30.3mg/L的培养基中胚轴生长最好；光培养30d长成完整的植株。（2）茎段再生体系：以MS为基本培养基，研究6-BA和IAA对不定芽再生的影响，研究结果表明，当6-BA浓度达到1.5mg/L，IAA浓度达到0.1mg/L时出愈率和出芽率达到最高，为80%和100%，且生长良好；最终确定最适合蜂蜜罐枣胚培苗茎段不定芽再生的培养基为：MS+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+AgNO30.5mg/L；将再生的不定芽接种至以1/2MS+0.5g/LAC为基本培养基中，研究IBA和NAA对不定根再生的影响，研究结果表明，当IBA浓度达到0.5mg/L时生根数较多，生根率较高，为60%，最终确定不定根诱导最适培养基为1/2MS+AC0.5g/L+IBA0.5mg/L；（3）叶片、子叶再生不定芽：培养40d左右的试管苗叶片（垂直主脉横切2~3刀，不伤及叶缘）和子叶（横切2~3刀，远轴面接触培养基）分别接种至WPM+NAA0.2mg/L+TDZ0.5mg/L+AgNO30.5mg/L和WPM+NAA0.2mg/L+TDZ0.5mg/L+AgNO30.5mg/L，暗培养10d后，产生愈伤组织，培养40d后，形成不定芽；（4）上胚轴切段再生不定芽诱导：上胚轴切段接种以MS+AgNO30.5mg/L为基本培养基，研究6-BA和NAA对不定芽再生的影响；研究结果表明，当6-BA浓度为1.0mg/L和NAA浓度为0.1mg/L时，出愈率达94%，不定芽再生率达63%，最终确定上胚轴切段再生不定芽的最佳配方为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+AgNO30.5mg/L；（5）下胚轴切段再生不定芽诱导：将下胚轴切段，接至3种不同培养基中，研究结果表明在MS+2,4-D1.5mg/L+6-BA0.5mg/L；出愈率高达94％，培养15d左右出现不定芽点，培养30d后形成不定芽，不定芽再生率达29%；（6）根再生不定芽诱导：将完整根直接接入MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+PVP1.0g/L的培养基中；培养约10d根表面出现愈伤，培养30d后，形成不定芽；2.载体改造及枣叶片转化Bt基因（1）枣叶片转化Bt基因：试验以蜂蜜罐叶片为转化受体，研究发现在菌液浓度为0.3时，侵染时间10min，培养50d后获得了5个不定芽。（2）载体改造：利用PCR和酶切法对转化子进行鉴定，研究结果表明目的基因Cry2A*已经插入pBI121表达载体中；目的基因Cry1C的鉴定采用酶切法，研究结果表明目的基因Cry1C*也已插入pBI121表达载体中。