观赏芍药胚培养及茎段愈伤组织诱导研究

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芍药(Paeonia lactiflora Pall.)是中国的传统名花,观赏价值颇高。本论文分别从芍药胚培养和茎段愈伤组织诱导两个方面,主要研究了胚龄对芍药幼胚诱导的影响、胚诱导出幼苗、叶芽的诱导和增殖、壮苗生根、驯化移栽以及‘大富贵’、’Sorbet’’Coral Sunset ’、’Duchess de Nemours’和’ Sarah Bernhard’5个芍药品种的愈伤组织的诱导、增殖和分化等。实验结果如下:1.‘粉玉奴’、‘种生粉’和‘朱砂判’三个品种花后90d(成熟胚)的诱导效果最好。去除种皮和胚乳的胚是最好的外植体处理方式。2.诱导胚苗的最佳组合为6-BA0.5mg/L+GA31.0mg/L。3.最佳的叶芽增殖培养基为1/2MS (Ca2+加倍)+6-BA1.0mg/L+GA31.0mg/L。不添加任何激素的1/2MS培养基是胚苗壮根的最佳培养基。4.1/2MS是’Coral Sunset’、’Duchess de Nemours’、和’ Sarah Bernhard’3个品种茎段愈伤组织诱导的最适基本培养基;不同品种茎段愈伤组织诱导的最佳激素组合为:TDZ0.5mg/L+NAA0.5mg/L(’大富贵’、’Sorbet’和‘Sarah Bernhard’)、 TDZ0.5mg/L+2,4-D0.5mg/L (’Coral Sunset’和’ Duchess de Nemours’)。5.‘大富贵’的最佳激素组合为2,4-D0.5mg/L+TDZ0.5mg/L或2,4-D1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+NAA0.5mg/L,’ Sorbet’为2,4-D1.0mg/L+TDZ0.5mg/L;’Coral Sunset’为’IDZ0.2mg/L+NAA0.2mg/L;’Duchess de Nemours’和‘Sarah Bernhard’分别为2,4-D1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+NAA0.5mg/L和2,4-D1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+NAA0.2mg/L。6.愈伤组织分化培养:‘大富贵’和’Sorbet’最佳愈伤组织分化培养基分别为WPM+NAA0.5mg/L+TDZ0.5mg/L和WPM+NAA0.5mg/L+TDZ0.2mg/L;黑暗培养有利于大富贵的不定芽的分化,并能有效抑制褐化和污染;适量的CH能促进愈伤组织的分化。’Coral Sunset’、’Duchess de Nemours’和’Sarah Bernhard’的最适宜的分化培养基分别为1/2MS(Ca2+加倍)+TDZ0.5mg/L+NAA0.5mg/L、 l/2MS(Ca2+加倍)+TDZ0.5mg/L+NAA0.5mg/L和1/2MS(Ca2+加倍)+TDZ0.1mg/L+NAA0.2mg/L,而液体培养方式对’Sarah Bernhard’的愈伤组织分化更有利。7.IBA为1.0mg/L最有利于’Coral Sunset’、Duchess de Nemours’和’Sarah Bernhard’不定根的分化,但最终未能诱导不定根的分化。8.延长培养周期和1/2MS培养基都能在一定程度上恢复褐化愈伤组织。
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