5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-fu)已经被广泛地应用于结肠癌和直肠癌的治疗,但是由于肿瘤细胞对它产生的耐药性目前临床上主要采用奥沙利铂或者伊立替康与5-fu联合用药的方案来提高化疗疗效,但是这些化学制剂在增加5-fu细胞毒性的同时,对正常细胞也有很大损伤,化疗产生的副作用更加突出,近来的研究表明调控细胞自噬可以改变肿瘤细胞对于5-fu的耐药性。姜黄素(curcumin,cur)在细胞内有很多靶点,之前的研究显示姜黄素主要通过对细胞凋亡途径的调控来抑制肿瘤细胞的生长,但是越来越多的研究表明细胞自噬也是姜黄素抗肿瘤活性的重要通路。本课题应用结肠癌HCT116细胞系模型针对细胞自噬途径研究姜黄素对于5-fu细胞毒性的影响及其作用机制。MTT和细胞形态学观察结果表明姜黄素与5-fu共同作用可以大幅度提高肿瘤细胞的死亡率,其中姜黄素预处理的作用方式效果最好。用western blotting和流式细胞仪检测技术对细胞自噬的标志性蛋白p62、 Beclinl和LC3进行的检测,结果表明5-fu引起肿瘤细胞的自噬反应,然而用姜黄素预处理后肿瘤细胞的自噬程度降低。研究表明,细胞自噬主要通过P-AKT、P-mTOR和P-AMPK对细胞自噬起始蛋白的活化进行调控,本课题通过western blotting实验对这几个蛋白的表达量进行测定,实验结果表明姜黄素主要通过下调细胞内P-AMPK的水平降低细胞自噬从而提高了5-fu对于HCT116结肠癌细胞的细胞毒性。