百菌清重复施用在土壤中的残留特征及其土壤生态效应

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设施生产环境的温湿条件和封闭性导致设施蔬菜病害高发、频发,杀菌剂使用频率高、施用次数多。高效、广谱的保护性取代苯类杀菌剂百菌清是设施蔬菜生产中常用杀菌剂,为评价百菌清重复使用可能导致的土壤污染及其生态风险,本文分别在室内模拟条件和设施菜地条件下开展了百菌清重复施用后在土壤中的降解特征及其对土壤呼吸和酶活性以及对土壤微生物群落多样性影响的研究。主要研究结果如下:1.推荐剂量(5mg kg-1)和双倍推荐剂量(10mg kg-1)百菌清重复处理后在土壤中的降解符合一级动力学,四次重复处理的降解半衰期分别为2.99、3.03、3.10、2.99天和6.14、7.75、7.00、6.05天。五倍推荐剂量(25mg kg-1)百菌清重复四次处理后15天,其降解百分率分别为42.2%、22.0%、13.1%和9.1%。百菌清在土壤中的半衰期与百菌清使用剂量和施药频次相关,高剂量施用明显抑制其在土壤中的降解并导致积累。2.利用Biolog微平板法研究了百菌清重复处理对土壤微生物功能多样性的影响。双倍剂量和五倍剂量四次重复处理后7天和15天,土壤微生物AWCD值、Shannon、McIntosh和Simpson指数受到抑制,表明土壤微生物群落碳源利用力、种群丰富度、均一性和优势种群大小受到抑制,且这种抑制作用随着培养时间的延长而呈现恢复趋势。3.研究了百菌清重复处理对土壤酶活性的影响。结果表明,百菌清对土壤过氧化氢酶和蔗糖酶活性无显著影响,但抑制土壤脱氢酶和中性磷酸酶活性,且这种抑制作用与施药剂量呈正相关。随着施药频次的增加,土壤脱氢酶活性逐渐恢复,土壤中性磷酸酶活性抑制作用加剧。双倍推荐剂量和五倍推荐剂量百菌清重复处理对土壤脲酶产生一定的抑制作用。4.采用底物诱导呼吸法和蚕豆根尖微核试验分别测定百菌清重复施用对土壤呼吸活性和土壤遗传毒性的影响。结果显示,百菌清重复施用抑制了土壤7h呼吸活性,且这种抑制效应与施药剂量呈正相关,但随施用次数的增加逐渐恢复;不同浓度百菌清处理土壤中蚕豆根尖细胞微核率均显著高于对照土壤,且与施药剂量呈正相关,表明百菌清重复施用诱导了土壤产生遗传毒性。5.采用PCR-TGGE法研究了百菌清重复施用土壤细菌群落结构的变化。研究发现,双倍推荐剂量和五倍推荐剂量百菌清重复处理后土壤细菌群落结构发生了改变,差异性条带割胶回收、克隆、测序后发现所测基因序列分别属于4大微生物类群,分别为芽孢杆菌目(Bacillales)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和放线菌门(Actinobacteria)。6.田间条件下研究了百菌清重复施用后在土壤中的积累性及其对土壤酶活性、土壤呼吸活性以及对土壤细菌群落结构多样性的影响。结果显示,百菌清及其主要代谢产物4-羟基百菌清在设施土壤中均产生积累,且积累效应与施药剂量呈显著正相关;推荐剂量百菌清重复施用对土壤脱氢酶活性和土壤呼吸活性没有显著影响,而五倍推荐剂量明显抑制了土壤脱氢酶活性和土壤呼吸活性;PCR-TGGE指纹图谱分析表明不同剂量百菌清重复施用未改变设施菜地土壤细菌落结构。
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