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病毒性疾病发病率高,流行范围广,对人类的健康构成很大威胁,特别是艾滋病及其病原病毒的发现、SAPS病毒的流行等,使病毒性疾病日益引起人们的重视。水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)归类于疱疹病毒科,人是其唯一的宿主,是引起人类水痘和带状疱疹两种疾病的病原。在免疫力低下的患者中,特别是HIV感染者,水痘和带状疱疹可出现严重的并发症;特别是带状疱疹具有特征性的神经痛,年老体弱者疼痛剧烈,甚至难以忍受,某些带状疱疹患者甚至在皮疹消退后,仍遗留神经痛,此种神经痛可持续数月甚至数年之久。因此及时有效地控制VZV感染无论是对于减少并发症还是减少后遗神经痛都是非常必要的。近年来新型抗病毒药物的出现和发展为VZV感染的治疗提供了更多的选择,如阿昔洛韦、更昔洛韦等。 目的:本实验通过VZV Vero细胞培养的方法分离VZV野生菌株,并运用细胞病变法评价抗病毒药物更昔洛韦和阿昔洛韦的Vero细胞毒性和体外抗VZV野生菌株和标准菌株活性。 方法:①采用Vero细胞培养的方法分离鉴定VZV野生菌株;②将分离鉴定的野生菌株VZV4和标准菌株VZV-Ellen确定感染滴度,计算半数组织培养感染量(median tissue culture infective dose,TCID50);③检测Vero细胞、Hela细胞、McCoy细胞对VZV的敏感性;④确定更昔洛韦和阿昔洛韦Vero细胞毒性,分别计算更昔洛韦和阿昔洛韦的半数中毒浓度(median toxic concentration,TC50)和最大无毒浓度(maximal nontoxic concentration,TC0);⑤进行更昔洛韦和阿昔洛韦体外抗VZV活性实验,分别计算更昔洛韦和阿昔洛韦抗野生菌株VZV4和标准菌株VZV-Ellen的半数有效浓度(50% effective concentration,EC50)和治疗指数(therapeutic index,TI)。 结果:①通过对VZV引起细胞病变的直接观察、Giemsa染色、HE染色、直接免疫荧光等方法,4株野生型VZV病毒得到鉴定;②临床分离的野生菌株VZV4的TCID50为10-3.08±0.35/0.2mL,标准菌株VZV-Ellen的TCID50为