舍雷肽酶是一种蛋白水解酶,具有强大的纤溶活性,可以用于治疗肿胀以及体液潴留等疾病,其抗炎活性优于市面上的其他蛋白水解酶。目前国内舍雷肽酶发酵生产尚未开发成功,而国内外市场对该的需求量逐年上升,所以开发高产舍雷肽酶的生产工艺具有十分重要的意义。本文从蚕肠道中分离筛选舍雷肽酶高产菌株,并研究其发酵工艺条件和酶的分离纯化步骤方法,并对部分酶学性质进行考察。首先,从临安、湖州以及广州等地购得的蚕体内分离出了7株在30℃平板培养时形成红色菌落的菌株,其中一株编号为LL-413的菌株表现出极好的蛋白水解活性,在脱脂牛奶平板上30℃培养时,能产生红色菌落并在菌落周围形成明显的透明水溶圈。摇瓶发酵测得该菌株产舍雷肽的活力为113.4 U/mL。经形态学和16S rDNA测序分析,鉴定该菌株为一株粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）。之后,采用单因素实验和响应面试验,优化了产酶发酵工艺。经过优化后的较佳摇瓶产酶培养条件为:培养基组成为酵母浸出粉11 g/L,牛肉膏6.6 g/L,麦芽浸粉12.2 g/L,MgSO₄ 1 g/L,NaCl 5 g/L;培养基初始pH 8.0;培养温度30℃,培养时间40 h;此条件下酶活达到1126 U/mL,比优化前的113.4 U/mL提高了近10倍。随后,进行了10 L机械搅拌发酵罐放大实验,在装液量为6.5 L,接种量为5%,发酵温度为30℃,溶氧量控制在50%以上,发酵液的pH控制在8左右,发酵只需8 h,菌体的生物量达到9.8 g/L,酶活达到1534 U/mL,较摇瓶发酵提高了36.2%。最后,对舍雷肽酶进行了分离纯化和部分酶学性质的初步研究。经过盐析、透析、超滤以及DEAE-Sefinose离子交换层析纯化后,纯化后的酶比活为8044 U/mg,纯化了约2.1倍,酶活回收率为20.7%;利用纯化得到的冻干酶进行了酶学性质的研究,结果表明:舍雷肽酶最适的反应温度为40℃,最适的反应pH为8.0,K_m为22.84 g/L,V_max为1.37 U/min,纤溶活性在100000 U/g左右。SDS-PAGE凝胶电泳结果表明,来自LL-413菌株的舍雷肽酶相对分子量约为50 kD。