研究目的:SU1498是一种小分子抑制剂,可能具有潜在抑制VEGFR-2的作用,但其与眼部新生血管性疾病间的关系尚未有研究报道。本研究旨在探讨SU1498对眼部新生血管疾病的抑制作用及其机制。研究方法:1.通过离体和在体实验检测SU1498的组织和细胞毒性作用。离体细胞实验选用人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)细胞株,使用不同浓度的SU1498处理细胞,采用MTT实验检测细胞活性。在体角膜实验选用ICR小鼠,在体视网膜实验选用C57BL/6小鼠:采用HE染色检测SU1498对小鼠角膜和视网膜组织结构的影响;采用TUNEL染色检测SU1498对角膜和视网膜凋亡的影响。通过上述实验探究SU1498的安全性,并确定本次实验中的药物作用浓度。2.在体构建小鼠角膜碱烧伤(Alkali-burn)模型,诱导角膜病理性新生血管生成。实验分6组:正常ICR小鼠、Alkali-burn-ICR小鼠、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)滴眼小鼠、SU1498滴眼小鼠、贝伐单抗(Bev)滴眼小鼠、Bev+SU1498滴眼小鼠。采用裂隙灯眼前节拍照观察各处理组小鼠角膜病理性新生血管的长度和数量,探究SU1498对角膜新生血管生成的作用。3.在体构建激光诱导的小鼠脉络膜新生血管(Laser-induced choroidal neovascularization)模型。实验分6组:正常C57BL/6小鼠、Laser-C57BL/6小鼠、生理盐水(Vehicle)玻璃体腔注射小鼠、SU1498玻璃体腔注射小鼠、贝伐单抗(Bev)玻璃体腔注射小鼠、Bev+SU1498玻璃体腔注射小鼠。采用脉络膜平铺片IB4染色观察脉络膜新生血管的面积,采用HE染色观察脉络膜新生血管纵切面的厚度,探究SU1498对脉络膜新生血管生成的作用。4.血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)是病理性血管生成的重要调节因子。体外使用VEGF刺激HUVECs 24 h,模拟体外病理性新生血管模型。实验分6组:未处理组(Ctrl)、VEGF刺激组、SU1498(10n M和50 n M)处理组、贝伐单抗(Bev)处理组、Bev+SU1498联合处理组。24 h后采用MTT法以检测细胞活力;采用Ki67和Ed U染色检测细胞增殖能力;采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力;采用成管实验检测细胞管腔形成能力。5.提取各处理组蛋白采用Western blot法检测血管内皮细胞内MAPK信号通路相关蛋白磷酸化水平,探究SU1498发挥抗新生血管作用的分子机制。研究结果:1.有效作用浓度下的SU1498对HUVECs无细胞毒性,对小鼠角膜和视网膜无组织毒性。2.SU1498滴眼可有效抑制碱烧伤小鼠角膜病理性新生血管的生成,且与贝伐单抗联用可发挥增强作用。3.SU1498玻璃体腔注射可有效抑制激光诱导的小鼠脉络膜新生血管的生成,且与贝伐单抗联用可发挥增强作用。4.SU1498体外应用可有效抑制VEGF诱导的HUVECs的增殖、迁移和成管,且与贝伐单抗联用可发挥增强作用。5.SU1498通过调控p38-MAPK信号通路发挥对眼部病理性新生血管的抑制作用。结论:小分子抑制剂SU1498可通过抑制p38-MAPK信号通路的激活对眼部病理性新生血管发挥抑制作用。SU1498可能是治疗眼部新生血管疾病的新型小分子药物。