金包硅纳米材料标记的试纸条对于转基因序列的检测研究

来源 :安徽科技学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nj_wpp1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
侧流层析试纸条由于其检测快速、操作简单且不需要复杂贵重仪器等特点被广泛应用于食品安全检测、临床诊断、环境监测等领域。目前,商用的试纸条标记材料为胶体金,受限于其特定的比表面以及有限的检测探针承载能力,试纸条检测的灵敏度相对较低,在低浓度样本中容易出现的假阴性问题亟待解决。贵金属核壳结构纳米材料具有优于贵金属的一些特点,近年来将金纳米粒子吸附在SiO2纳米微球表面的研究受到广泛关注,SiO2具有良好的化学稳定性和高比表面积等特点,SiO2层能显著提升金纳米颗粒的物理、化学、机械稳定性,且能解决胶体金易团聚和检测限不够灵敏的问题。因此,本文构建SiO2@Au标记的试纸条核酸生物传感器,采用夹心法的识别原理,实现对转基因Codon序列的高灵敏度快速检测。以下两个方面为本论文的主要内容:(1)SiO2@Au的制备:基于St?ber法制备二氧化硅球,通过改变正硅酸乙酯(TEOS)和氨水的添加量来调节硅球粒径的大小,经优化后发现添加6 mL98%的正硅酸乙酯(TEOS)和6 mL25%氨水效果最佳,成功制备了粒径为200 nm的硅球。此外,利用硼氢化钠和柠檬酸三钠还原法制备了不同尺寸的纳米金颗粒,通过透射电子显微镜(TEM)、紫外分光光度计、纳米粒度仪对制备的纳米金粒子、硅球、SiO2@Au进行表征。实验结果显示,当硅球直径为200 nm,纳米金颗粒为5nm时,所制备的SiO2@Au大小均一,无聚集现象,且硅球表面负载了大量的纳米金颗粒,效果良好,可作为试纸条的标记材料用于后续实验。(2)转基因Codon序列的试纸条检测:制备了SiO2@Au标记的试纸条并利用夹心法对转基因Codon序列进行检测。在最优实验条件下,响应信号强度与Codon浓度在5pM到100pM范围内有良好的线性关系,检测限为5pM。为了更进一步研究SiO2@Au标记的核酸试纸条传感器的分析性能,我们对其稳定性、重现性和特异性等进行研究,结果显示,此试纸条具有良好的稳定性、重现性和特异性。SiO2@Au标记的核酸试纸条比传统的胶体金试纸条灵敏度提高了100倍。
其他文献
教育戏剧不是单纯地让学生表演,而是一种沉浸式学习,通过"演"来开发学生的多元智力,将戏剧教学中定格、入戏、角色扮演、思路追踪、坐针毡等方式用于初中英语教学中,寓学习于游戏,可以改变以往课堂沉闷、单调的氛围,同时可以提高学生的口语交际、肢体语言表达、情感体验等能力。
期刊
水貂阿留申病、水貂犬瘟热病和水貂细小肠炎病是水貂常见的传染性疾病,分别由阿留申病毒(Alertian Disease virus,ADV)、犬瘟热病毒(Canine Distemper virus,CDV)和细小病毒(Mink Enteritis parvovirus,MEV)感染水貂引起。这三种水貂传染病易出现混合感染的情况,临床鉴别诊断困难。因此,建立一种能够准确、快速,并且适用于临床大批量检
学位
为了考察鹅的品种以及确定不同能量和蛋白水平对鹅的常规肉品质、肌肉营养成分、肌肉组织学特征等的影响,本研究共进行了两个试验。试验一:本试验旨在研究三个品种鹅肉品质是否存在差异及选出较优质鹅种。试验选用体重相近、且健康活泼的30日龄皖西白鹅、三花鹅、泰州鹅各30只组成试验鹅群。在相同的日粮、环境等条件下饲养至90 口龄进行样本采集。测定了肌肉PH值、滴水损失、营养成分、肌纤维密度等指标,研究不同品种对
学位
为研究不同浓度硼对大鼠小肠上皮细胞增殖凋亡、屏障功能及组织结构的影响。本试验选用IEC-6细胞系为实验对象,采用CCK-8和流式细胞术等技术检测硼对IEC-6细胞的毒性作用及凋亡和周期的影响,筛选出0.8 mmol/L和40 mmol/L硼酸浓度为体外培养IEC-6细胞时的适宜添加量。然后加硼和特异性阻断剂阻断PI3K/AKT信号通路,检测PI3K和AKT分别单独阻断前后IEC-6细胞凋亡率、周期
学位
随着家禽养殖业的不断发展和壮大,对家禽传染性疾病的防治越来越受到人们的重视。禽网状内皮组织增生病病毒(REV)目前依然缺乏行之有效的商业化疫苗,感染该病毒后会导致家禽的免疫抑制,并与其他病原一起造成混合感染,严重影响了家禽养殖业的健康发展。本次研究中,以1日龄SPF雏鸡做为试验动物,将雏鸡随机分为两组,分别是禽网状内皮组织感染组(I组)和病毒感染阴性对照组(C组)。应用western blot、化
学位
本文研究谷氨酰胺对冷应激雏鸡生长发育、血清生化指标、抗氧化能力与肠道微生物区系的影响。试验选用1日龄健康白羽肉鸡192只,随机分为4组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ),每组4个重复,每个重复12只肉鸡。Ⅰ组为对照组,饲喂玉米-豆粕型基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加1.0%、1.5%、2.0%Gln。鸡舍温度维持25±2℃,试验期14 d(1~14日龄),按试验设计进行取样和相关指标测定,试验结果如下:
学位
本文以冷冻猪肉为原料,通过自然解冻方法与十梯度解冻(T10)、五梯度解冻(T5)、三梯度解冻(T3)方法进行对比,并以解冻损失、差示扫描量热法(DSC)、水分分布(LF-NMR)为指标,研究不同解冻方法对猪肉的保水性及品质的影响,并优化出最优的低温解冻方法。以此提高解冻损失率,保持猪肉质量,并拓宽和优化组合解冻工艺在肉类行业的应用。同时,采用秋葵多糖与其他食品胶进行复配,以保水性为指标采用响应面分
学位
目的:探究发芽绿豆多酚提取物对Ⅱ型糖尿病(T2DM)模型小鼠糖脂代谢的改善作用。方法:根据C57BL/6小鼠体重随机分为正常对照组、模型组、发芽绿豆多酚提取物高、中、低剂量组、阳性对照组。通过高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立2型糖尿病小鼠模型。连续灌胃5周后,测定小鼠空腹血糖值、葡萄糖耐量、脏器指数、血脂水平等指标,观察肝脏组织形态。结果:与模型组相比,发芽绿豆多酚提取物能降低小
期刊
本试验以青脚麻鸡为试验动物,研究绿原酸(Chlorogenicacid,CGA)对青脚麻鸡生产性能、屠宰性能、肌肉品质、生化指标、抗氧化能力、免疫器官发育及小肠组织结构的影响。试验选取240只1日龄的雌性青脚麻鸡,随机分为对照组、CGA600组、CGA800组、CGA1000组共4组,每组3个重复,每个重复20只。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮水平上分别添加600、800、1000 mg/k
学位
禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)是一种携带RNA的逆转录病毒。REV感染禽后,可引起严重的禽免疫抑制性疾病。胸腺在REV感染后明显萎缩,这与REV导致的宿主免疫机能下降密切相关。黑色素瘤分化相关基因-5(melanoma differentiation-associated gene-5,MDA-5)属于视黄酸诱导基因(retinoic a
学位