宫颈癌前病变的临床及实验研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hunterfall_horse
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目的:探讨端粒酶激活及MN蛋白表达在宫颈癌变过程中的意义及作为病情监测办法和预测CIN结局的可能性。 方法:采用PCR-TRAP方法检测CIN、宫颈癌、慢性宫颈炎及正常宫颈妇女宫颈脱落细胞、宫颈活检组织的端粒酶活性;提取HeLa细胞RNA,经RT-PCR法获得MN cDNA片段,经基因重组技术获得含目的片段的重组质粒,大肠杆菌中诱导目的蛋白的表达,硫酸铵沉淀及凝胶过滤法纯化蛋白,用获得的融合蛋白免疫BalB/C鼠,获得鼠抗MN多克隆抗血清,抗体鉴定后,用得到的鼠抗MN多克隆抗血清对各种宫颈病变组织及脱落细胞进行免疫组化染色。 结果:CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ及宫颈癌、正常宫颈、慢性宫颈炎患者的宫颈脱落细胞端粒酶的活性分别为62.5%、60%、82.4%及61.9%、20%、25%;对应的活检组织的端粒酶活性分别为50%、45%、96.43%及95.23%、26.67%、30%;各级CIN患者的端粒酶活性明显高于正常宫颈及慢性宫颈炎;CIN-Ⅲ及宫颈癌组织的端粒酶活性明显高于CINⅠ、Ⅱ;CIN-Ⅲ与宫颈癌的端粒酶活性无明显差异;宫颈脱落细胞与宫颈活检组织的端粒酶检测结果的对应性良好。所研制的鼠抗MN多克隆抗血清具有与天然MN蛋白结合的能力;宫颈癌、高度CIN病变、低度CIN病变及宫颈良性病变组织的MN蛋白的表达率分别为90%(9/10)、88%(22/25)、80%(12/15)及5%(1/21)。 CIN及宫颈癌组织的MN蛋白表达率明显高于宫颈良性病变组(P<0.05),CIN-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及宫颈癌之间MN蛋白表达率无明显差异(P>0.05),但宫颈瘤性病变组织中,MN阳性细胞率随着宫
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