转基因植物中的除草剂或抗生素抗性标记基因的生态环境和食用安全性一直颇有争议，无选择标记策略提供了解决抗生素或除草剂等标记基因所引起疑虑的一种新思路。 本研究去除过程中采用位点特异性重组的方法，通过把NPI抗病基因插入到无选择标记载体pX6-GFP中，构建了带有目的基因的可去除标记载体pX6-NPI和pX6-GFP-NPI，PCR与酶切方法结果表明了两个载体成功构建。随后利用这两个载体，开展了烟草和NL-895杨的遗传转化研究，所得出的主要结论如下： 1.无选择标记载体pX6-GFP中可以加入目的基因，直接应用于植物的遗传转化。 2.目的基因的插入酶切位点选择比较困难，必需使用中间载体，本文提供了一种插入其它目的基因的可行性思路。 3.本实验中使用的农杆菌菌种为EHA105，属于活性比较强的菌种，转化过程中设置成四种Cef梯度(50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L)来对两种载体转化过程中的烟草进行Cef敏感性测试，结果表明，一般使用的Cef浓度为50mg/L并不能抑制农杆菌生长，当达到150mg/L时可以很好的抑制农杆菌。 4.利用构建的表达载体在烟草的遗传转化实验中，烟草的分化率都达到100％，最后共获得了12株转pX6-GFP烟草和10株转pX6-GFP-NPI烟草，通过PCR检测，扩增出了与质粒目的片段大小一致的条带，说明两种载体的烟草转化成功，结果初步表明构建载体的可用性。 5.在转NL-895杨的实验中，转两种载体杨树的的分化率都在10％～30％之间，低于通常转基因的分化率，其原因可能是载体较大，约15000bp，在转化时比较困难。