NDRG1基因在肺腺癌细胞及组织中的表达及意义

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目的研究NDRG1基因在肺腺癌中的表达及其在肺腺癌发生、发展中的意义。建立稳定转染含NDRG1的肺腺癌A549细胞株,探讨NDRG1对A549细胞增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法应用免疫组织化学方法检测20例正常肺组织和94例肺腺癌组织中NDRG1、P21及VEGF蛋白的表达情况,并分析三者与其临床病理参数的相关性。运用Spearman秩相关观察三者蛋白表达的相关性。运用Kaplan-Meier生存曲线分析其表达与患者预后的关系。经脂质体介导将含有NDRG1重组表达质粒转染人肺腺癌A549细胞株,采用G418筛选阳性细胞克隆及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹鉴定;qRT-PCR和蛋白质印迹检测阳性细胞克隆P21及MDM2表达;MTT比色法检测稳定高表达NDRG1的N11克隆的增殖活性;流式细胞仪检测稳定高表达NDRG1的N11克隆的凋亡率。结果(1)在正常肺组织、肺腺癌组织中NDRG1阳性率分别为90.0%(18/20)和51.2%(49/94),P21阳性率分别为80.0%(16/20)和33.0%(31/94),VEGF阳性率分别为20.0%(4/20)和53.2%(50/94),差异均具有统计学意义。肺腺癌组织中NDRG1、P21的表达与淋巴结转移情况呈负相关,VEGF的表达与淋巴结转移情况呈正相关。NDRG1表达与P21表达呈正相关,NDRG1和P21表达与VEGF表达均呈负相关。单因素生存分析表明:NDRG1、P21和VEGF表达水平与生存显著相关,差异均有统计学意义。(2)成功建立高表达NDRG1的阳性A549细胞克隆(N11);N11细胞P21表达及细胞凋亡率显著增高(P<0.05),而MDM2表达及细胞增殖显著降低(P<0.05)。结论(1)肺腺癌中NDRG1和P21表达下调,而VEGF表达上调,NDRG1和P21表达增加提示患者有较低的淋巴结转移率,NDRG1可能为一个新的肿瘤转移抑制基因,在肺腺癌发生、发展过程中发挥一定作用,NDRG1、P21和VEGF的联合检测对判断肿瘤预后具有一定意义。(2)上调A549细胞NDRG1表达后,细胞凋亡增加而细胞增殖降低,其作用机制可能与P21表达增高而MDM2表达降低有关。
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