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来自山羊草属的某些染色体,在单体附加到不同基因型的普通小麦中时,具有完全或不完全的杀配子作用,在不完全杀配子作用下,可高频率诱导各种类型的染色体结构变异,在小麦遗传育种中发挥着重要的作用。但是杀配子染色体的分子作用机制至今还不清楚。 本研究创制NL26-3C杀配子染色体单体附加系材料,对NL26与NL26-3C单体附加系的花药组织进行miRNA高通量测序,以TaqMan检测技术验证高通量测序的结果。筛出与杀配子作用相关的miRNA,为揭示杀配子染色体的分子作用机制奠定基础。主要研究结果如下: 1.以NL26为母本,NL26-3C杀配子染色体二体附加系为父本进行杂交,获得F1代材料。以3C特异SCAR标记对F1材料进行鉴定,证明了其含有3C杀配子染色体。对F1代材料根尖进行染色体制片观察,结果显示,染色体数为43条,确定杂交获得的F1代材料为NL26-3C杀配子染色体单体附加系。 2.对NL26和NL26-3C单体附加系花药进行高通量测序,获得来自77个家族的133个已知miRNA,4个新miRNA。其中有9个miRNA在NL26-3C单体中表达显著高于NL26,11个miRNA在NL26中表达显著高于NL26-3C。对差异表达miRNA进行了靶基因功能预测。结果显示,这些miRNA主要行使分子结合、酶的催化等功能,参与了细胞形成、细胞代谢等过程。 3.选取差异表达的miR9657b-3p,应用TaqMan技术检测它在NL26和NL26-3C中的表达量。结果显示,miR9657b-3p在NL26-3C中的表达显著高于NL26,与高通量测序分析结果一致。确定miR9657b-3p为研究杀配子染色体分子机制的候选miRNA。