【摘 要】
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目的:建立辽东楤木叶总皂苷指纹图谱,测试辽东楤木叶总皂苷抗肿瘤效果,构建辽东楤木叶总皂苷抗肿瘤“药效”与“指纹图谱”之间的谱-效关系。为辽东楤木叶抗肿瘤药物的质量控制及疗效评价提供参考标准。进一步明确辽东楤木叶抗肿瘤药效组分,也为深入研究辽东楤木叶抗肿瘤有效成分增效组合奠定基础。方法:1.辽东楤木叶指纹图谱建立和分析以高效液相色谱（HPLC）、配以蒸发光散射检测器（ELSD）为分析手段,对15批次
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目的:建立辽东楤木叶总皂苷指纹图谱,测试辽东楤木叶总皂苷抗肿瘤效果,构建辽东楤木叶总皂苷抗肿瘤“药效”与“指纹图谱”之间的谱-效关系。为辽东楤木叶抗肿瘤药物的质量控制及疗效评价提供参考标准。进一步明确辽东楤木叶抗肿瘤药效组分,也为深入研究辽东楤木叶抗肿瘤有效成分增效组合奠定基础。方法:1.辽东楤木叶指纹图谱建立和分析以高效液相色谱（HPLC）、配以蒸发光散射检测器（ELSD）为分析手段,对15批次不同地区和不同采收时期的辽东楤木叶进行化学指纹图谱分析;运用国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件2012A版”建立指纹图谱、并进行相似度评价。采用SPSS 20.0数据软件进行聚类统计分析。2.抗肿瘤活性测试和分析采用MTT法,以人肺腺癌细胞（A549）、人宫颈癌细胞（HeLa）、人结肠癌细胞（HT-29）、人肝癌细胞（SMMC-7221）四种肿瘤细胞为药效模型,对15批次辽东楤木叶提取物进行抗肿瘤活性测定。采用SPSS 20.0数据软件分析获得的肿瘤半数抑制率从而得到IC50数据。3.抗肿瘤谱-效关系建立运用Excel数据软件,通过数理模型,采用灰色关联度等方法相结合,将指纹图谱量化特征峰面积与抗肿瘤活性指标数据IC50结合进行谱效关系分析,构建辽东楤木叶抗肿瘤“化学谱”-“药效”关系。结果:1.通过对1 5批辽东楤木叶进行分析,建立了辽东楤木叶药材HPLC-ELSD指纹图谱,建立28个指纹共有峰,指认出8个峰代表的具体成分。多数样品间的相似度在0.9以上,个别样品间的相似度较低。2.根据本实验15批药材总皂苷对4种细胞的抑制率及IC50值结果确定,不同产地、不同采收期的辽东楤木叶均具有抗肿瘤作用,抗肿瘤药效有一定的差异。3.数理统计分析谱-效关系结果表明,各特征成分与抗A549细胞作用贡献关联度0.8以上的物质有12种;28个特征成分与抗HeLa细胞作用贡献关联度0.8以上的物质有13种;28个特征成分与抗HT-29细胞作用贡献关联度0.8以上的物质有11种;28个特征成分与抗SMMC-7221细胞作用贡献关联度0.8以上的物质有11种。结论:1.辽东楤木叶总皂苷的HPLC-ELSD指纹图谱具有28个共有峰。能够体现出辽东楤木叶中皂苷成分的相对稳定性,指纹图谱建立方法可靠。所建指纹图谱可以用于辽东楤木叶药材质量控制。同时表明采收于我国东北地区7、8、9月份的辽东楤木叶符合该标准。2.各产地辽东楤木叶均具有抗肿瘤作用,抗肿瘤活性存在一定差异。3.辽东楤木叶总皂苷的HPLC指纹图谱与抗肿瘤谱效关系反映了辽东楤木叶药材的内在品质。指纹图谱的28个共有峰中,每个相关峰成分对于不同的肿瘤细胞相关的贡献力不同,相关峰成分间表现出一定的协同或拮抗关系,反映出来的药效是相关成分综合作用的结果。
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