MiR-1在食管鳞状细胞癌发病中的作用及其机制研究

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食管癌(esophagealcancer,EC)是我国常见的恶性肿瘤,病理类型以鳞状细胞癌(esophagealsquamouscellcarcinoma,ESCC)为主,目前已报道许多microRNAs(miRNAs)在EC中表达异常。新近研究表明miR-1在多种肿瘤中表达异常,但在ESCC中的生物学功能、相关的分子机制尚未见明确报道。本研究首先采用微流体芯片技术筛选淮安地区人群ESCC癌组织与癌旁组织差异miRNA表达,发现miR-1显著低表达于癌组织,进一步采用qRT-PCR技术进行验证,获得与芯片检测一致的结果。通过活体动物实验证实miR-1可以抑制ESCC肿瘤的生长。进一步将miR-1模拟物(mimics)或者抑制剂(inhibitor)转染人ESCC细胞株KYSE150,过表达/沉默miR-1,采用MTT、台盼蓝染色细胞计数法检测过表达/沉默miR-1对ESCC细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测过表达/表达沉默miR-1对ESCC细胞凋亡功能的影响,结果表明miR-1过表达可以抑制ESCC细胞的增殖、增加细胞的凋亡数,而表达沉默miR-1则具有显著促进ESCC细胞增殖、减少细胞凋亡的作用。通过多个在线数据库、生物信息学软件,对人miR-1生物学特征以及功能进行分析。结果表明人miR-1在物种进化上具有很强的保守性,其靶基因显著富集在癌症通路、与癌症发生相关的信号通路以及心肌通路中,HGF/MET信号通路中的关键蛋白MET、CyclinD1和CDK4是miR-1的潜在靶基因。进一步通过Westernblot技术检测过表达/沉默miR-1对ESCC中MET、CyclinD1和CDK4蛋白表达的影响,发现miR-1对MET、CyclinD1和CDK4蛋白具有直接调节作用。据此,我们推测:miR-1可能通过调节HGF/MET信号通路中的关键蛋白MET、CyclinD1和CDK4参与ESCC的发生机制。本研究初步探讨了miR-1在ESCC发生中的作用及其相关机制,为ESCC患者诊断和治疗提供了新的线索。
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