围刺配合电针治疗大鼠乳腺增生的实验研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dk0623
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目的:本课题采用己烯雌酚联合黄体酮肌注的方法,复制实验性乳腺增生大鼠模型。通过对各组大鼠乳头高度与直径、血清性激素的含量、乳腺组织病理形态及乳腺组织中雌激素受体(ER)表达情况的比较,观察围刺配合电针治疗乳腺增生模型大鼠的疗效,探讨其治疗乳腺增生的作用机理,为临床治疗乳腺增生提供理论依据和实验支持。   方法:   选用3月龄Wistar雌性未孕大鼠60只,其中随机选取40只大鼠作为造模组,采用己烯雌酚联合黄体酮肌注的方法,建立大鼠乳腺增生模型;其余20只大鼠作为空白对照组,采用生理盐水肌注进行造模对比。比较造模前后造模组与空白对照组大鼠乳头高度及直径,并于造模结束后随机抽取两组大鼠各10只,检测血清性激素水平,并取大鼠第2对乳房,进行常规HE染色,在光镜下观察组织形态表现,验证造模是否成功。造模成功后将造模组剩余的30只大鼠随机分为模型组、三苯氧胺组和针刺组,空白对照组剩余的10只作为正常组,随即开始治疗,针刺组:将大鼠抓取固定,对第2对左右乳房分别进行围刺后,接通电针仪持续刺激30分钟,并针刺膻中穴,留针30分钟;三苯氧胺组:三苯氧胺1.8mg/Kg灌胃;正常组、模型组、三苯氧胺组均采用针刺组所述方法抓取固定30分钟,正常组、模型组、针刺组采用与三苯氧胺组同体积的蒸馏水灌胃。4组大鼠的干预措施均为1次/日,连续30天。实验中分别于造模前后、治疗前及治疗10、20、30天测量各组大鼠第2对乳头高度及直径。4组大鼠均于末次干预结束后断头采血,用放免方法检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、泌乳素(PRL)、睾酮(T)水平;取下大鼠第2对乳房,常规HE染色,在光镜下观察组织形态表现;应用免疫组化法观察乳腺组织中ER表达情况,连接显微图像分析系统测量每个样本的平均光密度值(AOD)。   结果:   1:各组大鼠第2对乳头高度与直径的比较。   1.1:治疗前及治疗10、20、30天4组大鼠第2对乳头高度的比较治疗前针刺组、三苯氧胺组、模型组均高于正常组,差异具有显著性意义(P<0.05),但三组间比较差异无显著性意义(P>0.05)。治疗10天针刺组、三苯氧胺组与模型组相比,差异均无显著性意义(P>0.05)。治疗20天针刺组和三苯氧胺组均低于模型组,差异均具有显著性意义(P<0.05);针刺组低于三苯氧胺组,差异具有显著性意义(P<0.05)。治疗30天模型组高于正常组,差异具有显著性意义(P<0.05);针刺组和三苯氧胺组均低于模型组,差异均具有显著性意义(P<0.05);针刺组低于三苯氧胺组,差异具有显著性意义(P<0.05),针刺组与正常组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。   1.2:治疗前及治疗10、20、30天4组大鼠第2对乳头直径的比较治疗前针刺组、三苯氧胺组、模型组均大于正常组,差异均具有显著性意义(P<0.05),但三组间比较差异无显著性意义(P>0.05)。治疗10天针刺组和三苯氧胺组均小于模型组,差异均具有显著性意义(P<0.05);针刺组与三苯氧胺组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。治疗20天针刺组和三苯氧胺组均小于模型组,差异具有显著性意义(P<0.05),且针刺组低于三苯氧胺组,差异具有显著性意义(P<0.05),针刺组与正常组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。治疗30天模型组大于正常组,差异具有显著性意义(P<0.05);针刺组和三苯氧胺组均小于模型组,差异均具有显著性意义(P<0.05),且针刺组小于三苯氧胺组,差异具有显著性意义(P<0.05),与正常组比较差异无显著性意义(P>0.05)。   2:治疗后各组大鼠血清E2、P、E2/P、PRL、T水平的比较血清E2含量比较:模型组明显高于正常组,差异具有显著性意义(P<0.05);针刺组和三苯氧胺组均低于模型组,差异均具有显著性意义(P<0.05);针刺组与三苯氧胺组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。   血清P含量比较:模型组明显低于正常组,差异具有显著性意义(P<0.05);针刺组和三苯氧胺组均高于模型组,差异均具有显著性意义(P<0.05);针刺组与三苯氧胺组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。   血清E2/P值比较:模型组明显高于正常组,差异具有显著性意义(P<0.05);针刺组和三苯氧胺组均低于模型组,差异均具有显著性意义(P<0.05);针刺组与三苯氧胺组比较,有下降趋势,更接近正常组,但差异无显著性意义(P>0.05)。   血清PRL含量比较:模型组明显高于正常组,差异具有显著性意义(P<0.05);针刺组和三苯氧胺组均低于模型组,差异均具有显著性意义(P<0.05);针刺组与三苯氧胺组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。   血清T含量比较:模型组明显高于正常组,差异具有显著性意义(P<0.05);针刺组和三苯氧胺组均低于模型组,差异均具有显著性意义(P<0.05);针刺组与三苯氧胺组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。   3:治疗后各组大鼠乳腺组织病理学表现的比较光镜下观察,模型组与正常组相比,乳腺小叶、腺泡、腺导管数目增多,腺泡腔和腺导管明显扩张,腔内分泌物增多,上皮细胞增生明显,排列紊乱。针刺组和三苯氧胺组大鼠乳腺组织的病理表现相似,与模型组比较改善明显,乳腺小叶、腺泡和腺导管数目均减少,腺泡腔和腺导管萎缩,腔内分泌物亦减少,上皮细胞排列趋于规则,与正常组相近。   4:治疗后各组大鼠ER蛋白表达的比较模型组大鼠乳腺组织ER阳性细胞表达明显多于正常组,其AOD高于正常组,差异具有显著性意义(P<0.05);针刺组和三苯氧胺组乳腺组织ER阳性细胞表达AOD低于模型组,差异具有显著性意义(P<0.05);针刺组乳腺组织ER阳性细胞表达AOD与三苯氧胺组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。   结论:   1:围刺配合电针治疗在降低乳腺增生模型大鼠乳头高度及缩小乳头直径方面有较好的作用。   2:该法可有效调节乳腺增生模型大鼠的内分泌紊乱,明显降低乳腺增生模型大鼠血清E2、T、PRL水平,升高血清P水平,调节E2/P比值。   3:该法可明显改善乳腺增生模型大鼠乳腺组织病理形态。   4:该法可有效降低乳腺增生模型大鼠乳腺组织中ER表达。
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