【摘 要】
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狗牙根(Cynodon dactylon)是世界上著名的禾本科狗牙根属暖季型草坪草,其分布和应用范围广,具有抗逆性优良,耐热、耐旱和较强的适应能力,成坪时间短,同时也是一种优良牧草,被广泛应用于公园、路边、农业生产、护坡、球场建设、动物饲料等各种方面。酸性土壤限制了诸多经济植物的生长,铝是酸性土壤中的主要限制因素。降低土壤酸化问题已经成为当代植物研究者工作中亟需解决的关键问题之一。本研究以前期研究
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狗牙根(Cynodon dactylon)是世界上著名的禾本科狗牙根属暖季型草坪草,其分布和应用范围广,具有抗逆性优良,耐热、耐旱和较强的适应能力,成坪时间短,同时也是一种优良牧草,被广泛应用于公园、路边、农业生产、护坡、球场建设、动物饲料等各种方面。酸性土壤限制了诸多经济植物的生长,铝是酸性土壤中的主要限制因素。降低土壤酸化问题已经成为当代植物研究者工作中亟需解决的关键问题之一。本研究以前期研究构建的66份狗牙根核心种质为材料,利用水培法对狗牙根耐铝相关性状进行测定,筛选出耐铝种质;并利用EST-SSR分子标记分析狗牙根种质的遗传多样性及群体结构,同时采用关联分析方法找到了与狗牙根相关性状显著关联的标记位点,为狗牙根相关性状的基因定位、基因克隆和分子标记辅助育种等研究的开展奠定基础,对于改良狗牙根材料的遗传基础、选育优良耐铝品种及改进其育种进程起关键作用。具体研究结果如下:1.本研究选取了相对株高、相对叶长、相对叶宽、相对叶色、相对均一性、相对坪用质量、相对枯黄率、相对地上部干重、相对根系干重、相对全株干重和相对根长9个指标对不同地理来源的66份狗牙根材料的耐铝性进行初步评价,从而筛选出不同耐铝性的种质。结果表明:在2500 μmol/L铝浓度处理下,不同狗牙根种质之间的生长存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)差异,不同指标间的变异系数范围在5.74~36.56%,其中相对枯黄率变异系数最大(36.56%),而相对叶宽变异系数最小(5.74%);相对地上部干重与相对全株干重存在极显著正相关(P<0.01),相关系数为0.942;相对枯黄率与相对叶色的相关性达到极显著负相关(P<0.01),相关系数是-0.447。通过隶属函数法,将66份狗牙根种质分为4级,其中1级为极端耐铝型材料,包含4份材料,占总供试材料的6.06%;2级为较耐铝型材料,包含9份材料,占供试材料的13.63%;3级为中间型材料,包含42份材料,占供试材料的63.63%;4级为铝敏感型材料,包含11份材料,占供试材料的16.66%。通过对66份狗牙根材料耐铝性综合评价,筛选出了 5份耐铝的种质,依次是B300、B090、B480、B522和B404。2.本研究利用水培法对不同地理来源的66份狗牙根材料叶片的各项生理指标进行测定,结果表明,铝处理对狗牙根各生理指标都有较大的影响,铝胁迫造成细胞膜的破坏和活性氧防御系统失衡。狗牙根叶片细胞膜脂过氧化加剧,膜透性明显提高,大部分狗牙根材料SOD、POD、CAT活性增加。不同生理指标对铝胁迫的生理响应不同,各指标间的变异系数范围为15.68%~87.97%,其中,相对叶绿素变异系数最小,为15.68%,变异范围为73.00%~157.20%;相对POD变异系数最大为87.97%,变异范围为 16.30%~819.70%。3.根据实验所得的EST-SSR数据,对供试66份狗牙根材料的184个EST-SSR位点信息进行分析,狗牙根基因组的遗传多样性分析表明,50个多态性EST-SSR标记的观察等位基因(Na)变异范围为2~6个,平均值为3.720;有效等位基因(Ne)变异范围1.031~3.638,平均值为2.175;Nei’s基因多样性变异范围0.030~0.725,平均值为0.481;Shaanno信息指数(Ⅰ)变异范围0.078~1.390,平均值为0.876;PIC值的变异范围为0.030~0.676,平均值为0.433。群体结构分析结果将66份狗牙根材料划分为3个类群。基于狗牙根EST-SSR标记的分析,对66份狗牙根群体结构进行关联分析,通过GLM和MLM两个不同的模型进行标记与表型的关联分析。结果显示,利用GLM模型,找到与相关性状都存在关联的位点数共有33个,关联标记对表型性状的平均解释率介0.1330~0.6187,平均值为0.2845。利用MLM模型,找到与相关性状都存在关联的位点数共有33个,关联标记对表型性状的平均解释率为0.0698~0.6125,平均值为0.2567,其中两个模型与相关性状都共同关联的标记有22个。
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