【摘 要】
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本文旨在阐明白芷多糖的主要特性以及白芷多糖干预H22荷瘤小鼠后各免疫系统指标的变化,从而揭示这种新型多糖抑制H22肿瘤的潜在机制,以期为肿瘤治疗提供潜在的抗肿瘤药物成分。本实验以河北安国地产白芷为原料,在室温下采用水提醇沉法（90%乙醇）提取白芷粗多糖,通过透析和超滤的方法纯化得到白芷多糖（Angelica dahurica polysaccharide,ADP）,然后对ADP进行化学成分分析,基
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本文旨在阐明白芷多糖的主要特性以及白芷多糖干预H22荷瘤小鼠后各免疫系统指标的变化,从而揭示这种新型多糖抑制H22肿瘤的潜在机制,以期为肿瘤治疗提供潜在的抗肿瘤药物成分。本实验以河北安国地产白芷为原料,在室温下采用水提醇沉法（90%乙醇）提取白芷粗多糖,通过透析和超滤的方法纯化得到白芷多糖（Angelica dahurica polysaccharide,ADP）,然后对ADP进行化学成分分析,基础结构鉴定和体内抗肿瘤活性研究。通过苯酚硫酸法、考马斯亮蓝法和硫酸咔唑法测得ADP中总糖、蛋白质以及糖醛酸含量分别为91.04%,0.23%和12.69%。紫外全波长扫描结果证明了ADP中几乎不含蛋白质和核酸。纯化后经高效液相测得ADP分子量约为6.09×10~3 Da。傅里叶变换红外光谱图和离子色谱图显示,ADP是由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸,以0.09:0.61:1.88:1:0.14:0.63:0.03的比例构成的酸性多糖,包含α型和β型糖苷键结构。通过高碘酸盐氧化和Smith降解以及甲基化等表征手段对其结构进行进一步鉴定,推测ADP是以（1→3）连接的葡萄糖为主链,分支上可能存在（1→4,6）半乳糖、（1→4）半乳糖、（1→2）半乳糖、（1→5）阿拉伯糖以及（1→3）甘露糖。本文通过建立H22荷瘤小鼠模型来评估ADP的抗肿瘤活性。通过对不同组别中小鼠表观状态研究可看出,ADP处理组小鼠的体重变化,肿瘤生长速度和肿瘤终体积等指标均较模型组有所改善。此外,ADP还能够通过提高脾淋巴细胞增殖活性和NK细胞的杀伤力,来增强机体免疫功能。通过对小鼠肿瘤细胞周期分布的检测发现,ADP可以将H22肿瘤细胞周期阻滞在G0/G1期,破坏了正常的细胞分裂进程。并且使肿瘤细胞凋亡率从模型组的1.32%依次增至ADP处理组中的7.54%和19.32%。H＆E染色结果显示ADP处理组中肿瘤细胞出现了不同程度的凋亡现象,在200 mg/kg剂量组中凋亡特征尤为明显。综上所述,ADP的体内抗肿瘤活性可能与调控机体免疫功能有关,从而起到显著抑制H22细胞的生长。
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