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目的
探讨抗癌活性肽(anti-cancer bioactive peptide,ACBP)体外诱导人胃癌细胞凋亡的作用机制及其对凋亡相关基因Survivin、Caspase-3表达的调控。
方法
体外培养BGC-823细胞,MTT法测定不同浓度ACBP对BGC-823细胞的生长抑制率;光镜下观察细胞形态学变化;RT-PCR、Western-blot分别检测细胞凋亡相关因子Survivin、Caspase-3 mRNA及蛋白表达的变化。
结果
不同浓度(10-25.0ug/ml)的ACBP均能抑制BGC-823细胞的生长,且具有浓度和时间依赖性,25.0ug/ml ACBP作用72h抑制率为84.4%。光镜下观察显示ACBP作用48h、72h后,BGC-823细胞呈现出典型的凋亡和坏死改变。RT-PCR结果显示ACBP处理后,BGC-823细胞的Survivin mRNA表达明显下降、Caspase-3 mRNA表达明显增加。Western-blot发现ACBP能使BGC- 823细胞的Survivin蛋白的表达下降、Caspase-3蛋白的表达增加。
结论
ACBP对 BGC-823细胞的生长有明显的抑制作用,其抑癌机制可能与其调控细胞周期,激活细胞凋亡信号转导途径有关,ACBP使Survivin表达下降,Caspase-3表达明显增加,从而发挥其抗增殖作用。