【摘 要】
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外泌体是细胞主动向外分泌的大小均一的纳米级囊泡样小体,由多种哺乳动物细胞产生,可有效递送其分子货物至受体细胞。最近报道,植物来源的外泌体样纳米颗粒(exosome-like nanoparticles,ELNs)已经从西柚、葡萄、生姜、胡萝卜中被分离鉴定,并发现ELNs与哺乳动物来源的外泌体在结构和大小上均类似。本课题组从植物药汤剂中分离鉴定出一类外泌体样纳米颗粒,命名为汤剂体。汤剂体中包含脂质、
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外泌体是细胞主动向外分泌的大小均一的纳米级囊泡样小体,由多种哺乳动物细胞产生,可有效递送其分子货物至受体细胞。最近报道,植物来源的外泌体样纳米颗粒(exosome-like nanoparticles,ELNs)已经从西柚、葡萄、生姜、胡萝卜中被分离鉴定,并发现ELNs与哺乳动物来源的外泌体在结构和大小上均类似。本课题组从植物药汤剂中分离鉴定出一类外泌体样纳米颗粒,命名为汤剂体。汤剂体中包含脂质、化合物分子、蛋白质、RNA等成分,可能是植物药汤剂发挥作用的主要成分。植物小RNA可通过口服汤剂体的方式,治疗小鼠急性肺损伤模型,为跨物种调控领域增加了新的有力论据。然而,蒲公英汤剂体进入细胞的详细机制仍然未知。本论文在A549细胞模型上,用内吞通路的特异性化学抑制剂,以及敲减内吞通路中关键蛋白的手段,使用流式细胞术和激光共聚焦显微镜,评估荧光标记的蒲公英汤剂体进入细胞的机制。结果发现,亲溶酶体物质能显著抑制蒲公英汤剂体进入细胞;巨胞饮抑制剂细胞松弛素D和阿米洛利能显著降低蒲公英汤剂体的胞内摄入,且呈现剂量依赖性,敲减Rac1和PAK1也有效地抑制其进入细胞。这些结果提示我们,蒲公英汤剂体通过内吞进入A549细胞且主要由巨胞饮介导。由于纳米颗粒递送药物并发挥功能的能力在很大程度上取决于它们被细胞摄取的机制。详细机制的阐明将为其进一步开发作为载体递送“货物”奠定基础,为理解其介导的细胞间通讯提供新的角度。
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