目的:复发性流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）是一种常见的妊娠并发症,严重影响孕妇的身心健康,目前大约50%的发病机制尚不清楚。本课题组前期研究发现,高迁移率族蛋白1（high mobility group box 1,HMGB1）分子在不明原因复发性流产（unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA）患者的母胎界面高表达,但具体作用机制尚不清楚。本研究通过进一步检测URSA患者蜕膜组织中HMGB1和焦亡的表达情况,同时下调URSA小鼠HMGB1水平,探讨HMGB1在URSA患者和小鼠模型中具体的作用机制及治疗意义。方法:本研究建立URSA小鼠的动物模型,采用临床治疗流产的常用药物阿司匹林下调HMGB1,探讨阻断HMGB1对防治、治疗和逆转URSA的作用。将URSA小鼠模型分为正常组、URSA组和干预组,干预组在合笼前后给予小剂量阿司匹林,在妊娠第14天以颈椎脱臼法处死小鼠并留取血清和蜕膜组织。同时收集URSA早孕患者和自愿终止妊娠早孕者的流产蜕膜组织各75例,验证HMGB1参与URSA的作用。应用HE染色、免疫组化、Western Blot、免疫荧光和ELISA等方法检测人和小鼠母胎界面HMGB1及其受体（RAGE、TLR2、TLR4）、焦亡相关蛋白（NLRP-3、Caspase-1、GSDMD）和NF-κB的表达情况。结果:（1）成功建立了不明原因复发性流产的小鼠模型,对照组胚胎基本大小一致,数目较多;URSA模型组胚胎数目较小,胚胎大小不一,部分胎儿体积较小,呈坏死状态;阻断HMGB1的阿司匹林干预组可恢复胚胎数目,减少流产胚胎。（2）HE染色结果显示,与对照组相比,URSA模型组小鼠蜕膜组织细胞数目增多,细胞拥挤且排列紊乱,出现核破裂或核固缩,组织中浸润了大量的免疫细胞,而阿司匹林干预可明显改善URSA小鼠母胎界面的炎症反应。（3）免疫组化结果显示,对照组中,HMGB1蛋白被染成了褐色,主要表达于细胞核中,而URSA组小鼠蜕膜组织中HMGB1蛋白不仅表达于细胞核中,同时在细胞质和细胞间隙有大量的阳性细胞染色。在对照组NF-κB少量集中表达在细胞质和细胞核,URSA组小鼠蜕膜细胞质和细胞外充满了阳性染色,并且向核内易位。经过阿司匹林干预后,蜕膜组织中HMGB1恢复至主要在细胞核内表达,NF-κB阳性细胞减少。（4）Western blot结果显示,URSA组母胎界面蜕膜组织中HMGB1蛋白及其相关受体（RAGE、TLR2、TLR4）表达高于对照组,同时局部焦亡相关蛋白（NLRP-3、Caspase-1、GSDMD）表达也是高于对照组。而经过阿司匹林干预后,HMGB1及其相关受体和焦亡相关蛋白的表达均下调。（5）免疫荧光结果显示,对照组小鼠蜕膜中HMGB1表达于核内,CD68（巨噬细胞）与HMGB1平均荧光强度较弱、阳性细胞数量较少且重叠部分较少,说明妊娠小鼠母胎界面中巨噬细胞较少。URSA组小鼠蜕膜中HMGB1表达于细胞核及核外,HMGB1和CD68（巨噬细胞）双阳性细胞大量表达,平均荧光强度较强,且两者大部分可以重叠,说明URSA母胎界面中HMGB1主要由CD68+巨噬细胞产生的。而给予阿司匹林干预后显著减少蜕膜组织中HMGB1+、CD68+和双阳性细胞数量,说明阻断HMGB1可能通过减少巨噬细胞数量而降低HMGB1水平,亦可能直接阻止巨噬细胞产生HMGB1。（6）收集人群流产蜕膜组织,Western Blot结果显示URSA患者蜕膜组织中HMGB1和焦亡相关蛋白（NLRP-3、Caspase-1、GSDMD）的表达水平上升。免疫荧光结果显示URSA患者蜕膜中高表达的HMGB1来源于母胎界面蜕膜巨噬细胞主动分泌。结论:（1）HMGB1参与了URSA的发生。其主要机制可能为:母胎界面巨噬细胞主动分泌HMGB1,其在细胞外通过其受体进入细胞,激活NF-κB信号通路后诱导细胞焦亡,从而诱导无菌性炎症,最终导致母胎界面的破坏和URSA的发生。（2）通过给予小剂量阿司匹林作为HMGB1的阻断剂对不明原因的复发性流产具有预防和治疗作用。