HPV58型病毒E1^E4蛋白B细胞线性表位研究

来源 :复旦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lanxoceco2003
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宫颈癌是世界上第三常见的影响女性健康的癌症,而高危型HPV是感染是宫颈癌的病因,其中以HPV16型检出率最高,危害性也最大。HPV58型作为15种高危型HPV的一种,虽然在世界范围内的感染率比HPV16和HPV18低,却存在较大的地区分布的差异,特别是在我国东部和南部部分地区及其他亚洲东部地区有着很高的感染率和致死率。E1^E4是HPV一个早期非结构蛋白,它的表达关系到病毒的复制和侵袭,但其具体功能还未被人们完全了解,HPV58型E1^E4蛋白的相关研究报道更是缺乏,准确获得其全部表位信息对宫颈癌诊断、疫苗和抗体药物的研发具有参考作用。我们首先从生物信息学的角度对E1^E4蛋白进行了分析,E1^E4是一个亲水性蛋白,内部有几个亲水性较高的区域,在溶液中不稳定。利用现有的B细胞表位预测算法(亲水性算法、可及性算法、可塑性算法、二级结构预测算法)和软件(ABCpred、BepiPred)对HPV58型E1^E4蛋白B细胞线性表位进行预测,在对不同算法预测的B细胞线性表位结果进行整合时,我们发现这些结果有一定的一致性,分析出了该蛋白可能的B细胞线性表位所在区域,从整体上对HPV58型E1^E4蛋白B细胞表位有了大致认识。我们对HPV58型E1^E4蛋白进行了原核表达、纯化,并免疫三只雄性新西兰白兔,获得了其抗血清。随后,我们采用了改良的生物合成肽法,使用pXXGST-1短肽表达载体合成了13条覆盖整个HPV58E1^E4蛋白并相互重叠9个氨基酸的15肽,利用制备的E1^E4蛋白抗血清进行免疫印迹,综合三种抗血清的结果,我们鉴定出HPV58型E1^E4蛋白全部的B细胞线性表位共9个,集中在蛋白N端,并确定其中QSDDDSIYQTPETTP为HPV58E1^E4蛋白线性B细胞优势抗原表位。我们首次对HPV58型E1^E4蛋白全部B细胞线性表位作了初步研究,研究结果对HPV相关诊断试剂、疫苗和抗体药物的研发具有一定意义。
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