头穴透刺对急性脑缺血大鼠内源性神经干细胞增殖分化影响的研究

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目的:脑血管疾病具有发病率、致残率与病死率均高的特点,其中缺血性脑血管疾病最为常见。大量的临床和实验研究表明,头穴透刺治疗本病具有较好的疗效。脑梗死常造成患者神经功能丧失,神经元死亡不可避免,如何积极有效地促进脑梗死造成神经功能缺失的恢复,是目前研究的热点。本实验采用改良线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型,运用头穴透刺治疗,并对大鼠神经功能缺损进行评分,从内源性神经干细胞的增殖、分化方面探讨头穴透刺抗脑缺血损伤的作用机理。方法:选用雄性SD大鼠64只,体重200~250g,随机分为4组,即正常组、假手术组、脑缺血组与头穴透刺组,每组各16只。采用改良线栓法复制大鼠大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血模型,头穴透刺组在造模成功,待动物模型清醒后1h,采用针刺治疗,取百会透前顶、率谷透悬厘,接通G6805-Ⅱ型电针治疗仪,选用疏密波,强度为1mA,频率为2~15Hz,留针30min,每日治疗1次,连续治疗7日后,对大鼠神经功能缺损进行评分,运用免疫组化法检测海马齿状回(HDG)神经巢蛋白(Nestin), RT-PCR检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP) mRNA、神经元特异性烯醇化酶(NSE) mRNA的表达。结果:1.大鼠经栓塞右侧大脑中动脉造成脑缺血后,均出现不同程度的行为异常,表现为不能完全伸展左侧前爪,或出现向左侧转圈、倾倒等现象,表明造模成功。头穴透刺组大鼠神经功能缺损评分明显改善。与脑缺血组比较,经统计学处理,有极显著性差异(t=3.99,P<0.01)。2.脑缺血组大鼠海马齿状回Nestin表达较正常组和假手术组明显增加,经统计学处理,具有极显著性差异(P<0.01),提示模型大鼠脑缺血后,海马齿状回Nestin表达增加;与脑缺血组比较,头穴透刺组海马齿状回Nestin阳性表达明显增加,经统计学处理,具有极显著性差异(P<0.01)。3.脑缺血组大鼠海马GFAP mRNA表达较正常组和假手术组明显增加,经统计学处理,具有极显著性差异(P<0.01),提示模型大鼠脑缺血后,海马GFAP mRNA表达增加;与脑缺血组比较,头穴透刺组海马GFAP mRNA表达明显减少,经统计学处理,具有极显著性差异(P<0.01)。4.脑缺血组大鼠海马NSE mRNA表达较正常组和假手术组明显减少,经统计学处理,具有极显著性差异(P<0.01),提示模型大鼠脑缺血后,海马NSE mRNA表达减少;与脑缺血组比较,头穴透刺组海马NSE mRNA表达明显增加,经统计学处理,具有极显著性差异(P<0.01)。结论:1.急性脑缺血后,大鼠海马齿状回Nestin表达增加,海马GFAP mRNA表达明显增加,海马NSE mRNA表达明显减少,表明Nestin、GFAP mRNA、NSE mRNA参与了急性脑缺血的病理过程。2.头穴透刺可使急性脑缺血模型大鼠受损神经功能明显恢复,提示本法有显著抗脑缺血损伤的作用。3.头穴透刺能使脑缺血大鼠海马齿状回Nestin的表达增加,海马GFAP mRNA表达下调,海马NSE mRNA表达上调,表明本法能促进急性脑缺血大鼠内源性神经干细胞的增殖与分化。
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