不同糖浓度环境下单核细胞表面CD36表达水平的变化

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目的:(1)研究正常人与糖尿病患者血清中sCD36水平的变化,探讨sCD36在糖尿病发生、发展中的意义。(2)研究不同糖浓度及糖波动环境下单核细胞表面CD36表达水平之间的关系。(3)研究2型糖尿病患者CD36内含子3(intron3)[TG]重复序列基因多态性分布,探讨该基因多态性对2型糖尿病患者血脂和CRP的影响。(4)研究CD36基因多态性与在不同糖浓度环境下单核细胞表面CD36表达水平之间的关系。  研究对象及方法:  对象:随机选取在我医院健康体检者40名,临床和实验室检查均正常,排除肝、肾、内分泌和心脑血管疾病,作为正常对照组。在提取单核细胞后根据葡萄糖浓度的不同分组,即葡萄糖对照组、高糖组、糖波动组、甘露醇组。选取2004年12月-2010年12月在我院内分泌科住院的T2DM患者235例(男127例、女108例),年龄54.0±12.1岁作为T2DM组。T2DM诊断依据1999年WHO制定的诊断标准。根据血脂水平分组,即胆固醇(CHO)>6.45mmol/L为CHO异常组,CHO≤6.45mmol/L为CHO正常组;甘油三酯(TG)>1.88mmol/L为TG异常组,TG≤1.88mmol/L为 TG正常组;高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)<0.9mmol/L为 HDL-C异常组,HDL-C≥0.9mmol/L为 HDL-C正常组;低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)>3.12 mmol/L为LDL-C异常组,LDL-C≤3.12mmol/L为LDL-C正常组。  方法:(1)提取40例正常组的单核细胞,在不同糖浓度环境下刺激48小时,收集细胞进行流式细胞仪检测(CD36/CD14),CD36的表达示双阳性比率。不同糖浓度之间的数据以均数±标准差(-X±S)表示,行 t检验,多组间比较采用单因素方差分析。(2)应用聚合酶链反应(PCR)和PCR直接测序法对235例2型糖尿病患者及40例正常组者的CD36内含子3[TG]重复序列基因多态性分布,同时对235例T2DM的临床资料及生化指标进行回顾性分析。用SPSS17.0软件进行分析。(3)30例正常组的CD36内含子3[TG]重复序列基因多态性与单核细胞表面CD36表达水平之间进行t检验。(4)采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(Enzyme-1inked Immunosorbent Assay,ELISA)对正常健康人40例及糖尿病患者100例血清中sCD36进行检测。两组之间数据以均数±标准差(-X±S)表示,采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。  结果:(1)采用ELISA法测定血清sCD36,正常组与糖尿病组之间sCD36水平有统计学差异(p<0.05)。(2)提取30例正常人单核细胞中,葡萄糖对照组与高糖组之间有统计学差异(p<0.05)。(3)提取10例正常组人单核细胞,在相同的平均葡萄糖浓度条件下,糖波动组与相应的高糖组之间有统计学差异(p<0.05)。(4)在2型糖尿病患者中HLD-C异常组与HLD-C正常组;LDL-C异常组与LDL-C正常组;高CRP组和CRP正常组之间CD36内含子3[TG]重复序列基因多态性分布存在差异,有统计学意义(p<0.05)。(5)15例正常组的CD36内含子3[TG]重复序列基因多态性与单核细胞表面CD36表达水平之间无显著性差异(p>0.05)。  结论:(1)血清中sCD36水平在正常组与糖尿病组之间存在明显差异,并且糖尿病组明显高于正常组。(2)单核细胞表面CD36表达水平与葡萄糖浓度及糖波动的大小有关。(3)CD36内含子3[TG]重复序列基因多态性与2型糖尿病患者低HLD-C、高LDL-C、高CRP水平有关。
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