人类白细胞抗原-G siRNA真核表达载体的构建及稳定转染JEG-3细胞株的建立

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人类白细胞抗原—G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)属于非经典人类白细胞抗原Ⅰ类分子,主要有3个特点:选择性组织分布;有限的分子多态性;mRNA选择性剪接形成不同的异构体分子,分别编码不同的蛋白质分子亚型。近年来发现,HLA-G蛋白通过多种途径参与维持正常妊娠,如HLA-G阳性的细胞通过与妊娠期子宫蜕膜内自然杀伤细胞(uNK)、细胞毒性T细胞(CTL)等细胞表面抑制性受体(killer cell inhibitory receptor,KIR)相互作用而抑制细胞毒作用;调节Th1/Th2细胞因子释放向Th2细胞因子极向转化的过程;提高胚胎的卵裂速率等。HLA-G基因表达异常,会引起不孕,习惯性流产,先兆子痫等病理性妊娠。因此,HLA-G是人类生殖中的重要调控蛋白,研究HLA-G在妊娠中的作用在人类生殖生物学和生殖免疫学具有重要的理论意义,对于人类辅助生殖技术具有潜在的应用价值。 RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种广泛存在于生物体内的由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的、序列特异的同源基因转录后基因沉寂(post-transcriptional gene silencing,PTGS)现象。一般认为,RNAi的作用机制是含有19-23个核苷酸对的小RNA片段,即小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)作为中介分子,与Dicer和其他一些
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