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目的：了解磷酸化Erk1/2 (P-Erk1/2)和磷酸化Akt1(P-Akt1)在自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠阴茎海绵体中的表达及与勃起功能的关系。方法：1.实验动物：健康成年雄性SPF级自发性高血压大鼠(SHR)与对照组WKY各8只,14周龄,体重250-300g。2.阴茎勃起功能测定：麻醉前大鼠称重,以戊巴比妥钠对实验大鼠进行麻醉(30mg/Kg,腹腔内注射),暴露颈总动脉,用充满肝素盐水的30G针头成功穿刺,连接压力转换器,计算机连续监测记录平均动脉压(MAP)。取大鼠下腹正中切口,在10倍显微镜下仔细游离前列腺两侧后方,显露盆腔星状神经节,沿前列腺表面与直肠之间将denonvillies筋膜剪开,于前列腺背侧找到海绵体神经(corpus nerve,CN),用温生理盐水棉片覆盖,保护,备电刺激时使用。暴露阴茎海绵体后,以充满肝素盐水的24G针头插入右侧海绵体,连接另一个压力转换器,持续监测大鼠阴茎海绵体内压((intracavernosal pressure, ICP)。计算机记录一段ICP基础压后,将不锈钢电极置于海绵体神经,施加不同的电刺激(刺激电压分别为3V、5V,频率12Hz,波幅5ms,持续30s-60s),连续记录电刺激后ICP/MAP的变化。3.取材及制备：阴茎勃起功能测定完毕后,即在靠近阴茎海绵体根部处截取阴茎海绵体,以PBs液(0.01 moL／L,pH 7.4)冲洗净残存血液后去掉尿道及阴茎龟头部分,阴茎海绵体标本分为两部分,立即放入EP管,一部分中性甲醛固定后用于免疫组化分析,一部分于-70℃超低温冰箱保存用于RT-PCR实验。4.免疫组化测定P-Erk1/2和P-Akt1蛋白在大鼠阴茎海绵体中的表达：SP二步法,阴茎海绵体标本经石蜡包埋后,按免疫组化常规处理石蜡切片,PBS洗10min；0.3%H2O2-甲醇处理、30min；高压修复5min；10%正常羊血清室温封闭15min；滴加一抗于标本上,4℃过夜；PBS洗3次,每次10 min；滴加二抗,室温孵育30min; DAB显色。5. RT-PCR检测P-Erk1/2mRNA和P-Akt1 mRNA在大鼠阴茎海绵体中的表达：依据小量组织／细胞总RNA抽提试剂盒说明书及分子克隆实验指南(第二版)进行操作,在无菌工作台内提取阴茎海绵体组织总RNA,保存于-80℃超低温冰箱中,用Nanodrop按设备使用说明测量总RNA浓度,依常规RT-PCR步骤完成RT-PCR,电泳后用LAS-300成像仪扫描图像,对P-Erk1/2mRNA和P-Akt1mRNA进行半定量分析。6.实验数据用(?)±s表示,采用SPSS14.0软件行t检验分析,P<0.05认为有统计学意义。结果：3V和5V电刺激海绵体神经后SHR组ICP/MAP比值(0.26±0.06、0.28±0.04)均较WKY组(0.46±0.12、0.76±0.13)显著降低(P<0.05),P-ERK1、P-ERK2的mRNA和P-ERK1/2蛋白的相对表达量(积分光密度值IOD)在SHR组(0.81±0.05、0.91±0.06、47.22±10.05)较WKY组(0.42±0.04、0.68±0.14、7.49±1.45)显著升高(P<0.05)；P-Akt1的mRNA和P-Akt1蛋白的相对表达量在SHR组(0.90±0.05、11.17±2.21)与WKY组(0.92±0.06、10.91±1.86)无显著差异(P>0.05)。结论：高血压性勃起功能障碍的发生与阴茎海绵体P-Erk1/2的过度表达有关,而与P-Akt1的表达水平无明显相关。