【摘 要】
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目的:探讨以线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因作为DNA条形码检定中药制剂中羚羊角和全蝎的可行性。方法:以不同厂家生产的多种羚羊角和全蝎中药制剂为材料,经充分研磨后,采
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目的:探讨以线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因作为DNA条形码检定中药制剂中羚羊角和全蝎的可行性。方法:以不同厂家生产的多种羚羊角和全蝎中药制剂为材料,经充分研磨后,采用DNA提取试剂盒提取样品中DNA,以引物LCO1490和HCO2198或特异性引物0703、0705扩增线粒体COⅠ基因片段序列,PCR产物直接双向测序,将测序结果在GenBank中进行BLAST比对,并以DNAMAN和MEGA5.2软件构建同源树和NJ树,以NCBI中得到的赛加羚羊、东亚钳蝎和羚羊角、全蝎标准药材序列为对照,判定制剂中羚羊角和全蝎的真实性,并计算种内种间遗传距离。结果:8种羚羊角中药制剂中提取的COⅠ基因序列长度均为658bp,在同源树和NJ树中可与赛加羚羊和羚羊角标准药材聚成一支,并与outgroup完全分开,种内遗传距离为0~0.064,平均遗传距离为0.02,种间遗传距离为0.167~0.195;6种全蝎中药制剂中提取的COⅠ基因序列长度均为575bp,在同源树和NJ树中可与东亚钳蝎和全蝎标准药材聚成一支,并与outgroup完全分开,种内遗传距离为0~0.021,平均遗传距离为0.02,种间遗传距离为0.199~0.207。结论:以线粒体COⅠ基因作为DNA条形码检定中药制剂中羚羊角和全蝎方法是可行的,其中因赛加羚羊其它器官也含有相同的基因,为保证检验结果的准确性,还需配合使用其它检验方法。
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