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目的：研究无创性延迟肢体缺血预适应(NDLIP)对糖尿病(DM)大鼠心肌缺血再灌注(I／R)损伤的保护作用。方法：健康雄性Wistar大鼠经一次尾静脉注射2％链脲佐菌素(STZ)溶液45 mg／kg，造成急性糖尿病模型，随机分为4组。(1)假手术组(Sham组，n=13)：经冠状动脉左前降支(LAD)下穿线后，旷置；(2)I／R组(n=24)：LAD实施30 min缺血／120 min再灌注；(3)早期心肌缺血预适应组(EMIP组，n=24)：心脏LAD先行3次5 min缺血／5 min再灌注，随后实施30 min缺血／120 min再灌注；(4)NDLIP组(n=24)：左后肢实施3次5 min缺血／5min再灌注，每天1次，连续3天，第4天对心脏LAD实施30 min缺血／120 min再灌注。从ECG、心肌细胞损伤与死亡、心肌抗氧化能力、血管内皮功能、及纤溶系统功能及心肌能量变化等方面评价NDLIP延迟心脏保护作用。监测LAD 30 min缺血／120 min再灌注期间心率(HR)、平均动脉压(MAP)、ECG变化；TTC染色法测定心肌梗死面积，HE染色观察心肌形态学改变，TUNEL法检测心肌细胞凋亡，实时定量PCR和免疫印迹法分别检测凋亡相关因子Fas、FasL的转录和蛋白水平的表达；比色法测定心肌组织髓过氧化物酶(MPO)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、黄嘌呤氧化酶(XOD)活力，丙二醛(MDA)含量，以及血清一氧化氮(NO)浓度；RT-PCR法检测心肌Mn-SOD mRNA含量；免疫抑制法检测血清肌酸激酶MB型同工酶(CK-MB)活性；ELISA法检测心肌肌钙蛋白I(cTnI)、内皮素-1(ET-1)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)含量；HPLC-紫外法检测心肌组织ATP、ADP和AMP含量并计算腺苷酸池和能荷。结果：1．NDLIP对DM大鼠心肌I／R损伤所致心脏生理功能变化的影响与I／R组比较，NDLIP组I／R期间ST-段抬高幅度降低(P＜0．05)，EMIP组和NDLIP组室早(VPC)、室速(VT)出现时间推迟(P＜0．05或P＜0．01)，持续时间缩短(P＜0．01；P＜0．05)，VPC、VT和室颤(VF)发生率降低(P＜0．05；P＜0．01；P＜0．01)，对I／R期间HR和MAP变化的影响与I／R组比较无显著性差异。2．NDLIP对DM大鼠心肌I／R所致细胞损伤和坏死的影响与I／R组比较，EMIP组和NDLIP组再灌注末血清CK-MB活性升高幅度降低(P＜0．01)，cTnI含量增幅下降(P＜0．05和P＜0．01)，心肌梗死面积缩小(P＜0．01)，MPO活性降低(P＜0．05)，心肌形态学损伤减轻。EMIP和NDLIP保护作用相当。3．NDLIP对DM大鼠心肌I／R损伤所致细胞凋亡的影响与I／R组比较，EMIP组和NDLIP组心肌细胞凋亡减少(P＜0．01)，凋亡相关蛋白Fas、FasL表达减少(P＜0．01或P＜0．05)。EMIP和NDLIP保护作用相当。4．NDLIP对DM大鼠心肌I／R后抗氧化能力的影响与I／R组比较，EMIP组和NDLIP组心肌T-SOD(P＜0．01)、Mn-SOD(P＜0．01)、GSH-PX(P＜0．01)活力增强，Mn-SOD mRNA表达增加(P＜0．01)，XOD活性(P＜0．01)和MDA含量(P＜0．01)降低。EMIP和NDLIP保护作用相当。5．NDLIP对大鼠DM心肌I／R前后血管内皮功能的影响缺血前，与I／R组比较，EMIP组和NDLIP组血清NO浓度升高(P＜0．05)，ET-1／NO比值降低(P＜0．05)。再灌注后，EMIP组和NDLIP组血清ET-1升高程度降低(P＜0．01)，NO浓度得到保留(P＜0．05和P＜0．01)，ET-1／NO比值升高程度降低(P＜0．01)。EMIP和NDLIP保护作用相当。6．NDLIP对DM大鼠心肌I／R前后纤溶因子的影响缺血前，各组血清t-PA和PAI-1的含量均无显著性差异。再灌注后，各组血清t-PA含量与缺血前比较亦无显著差异。与I／R组比较，EMIP组和NDLIP组再灌注后血清PAI-1的升高程度显著降低(P＜0．05)。7．NDLIP对DM大鼠心肌I／R后能量状态的影响与I／R组比较，EMIP组和NDLIP组I／R后心肌ATP、ADP、AMP和TAN含量明显增加(P＜0．01；P＜0．01和P＜0．05；P＜0．05；P＜0．01)，ECP显著提高(P＜0．05)，各组间AMP含量无明显差异。结论：1．NDLIP明显降低DM大鼠心肌I／R所致ST-段抬高幅度，推迟缺血期VPC、VT出现时间，缩短其持续时间，降低恶性室性心律失常发生率，具有延迟抗心律失常作用，其保护作用强度与EMIP相当。NDLIP对DM大鼠心肌I／R所致MAP和HR变化无影响。2．NDLIP能减少DM大鼠心肌I／R所致CK-MB和cTnI释出，缩小心肌梗死面积，改善心肌形态学损伤，其抗细胞损伤与坏死的延迟保护作用强度与EMIP相当。机制可能与降低MPO活力有关。3．NDLIP能减少DM大鼠I／R后心肌细胞凋亡，下调凋亡相关因子Fas、FasL mRNA和蛋白的表达，其抗细胞凋亡的延迟保护作用强度与EMIP相当。这可能是其限制心肌梗死面积的延迟相心脏保护作用机制之一。4．NDLIP能增强DM大鼠I／R心肌的抗氧化能力，减轻过氧化损伤，此作用强度与EMIP相当。5．NDLIP能增加DM大鼠基础状态下的血清NO浓度，使ET-1与NO之间的平衡向NO移动。I／R后，NDLIP减轻血管内皮功能障碍，保留血清NO浓度，降低ET-1升高幅度，使ET-1与NO之间的平衡接近正常，其保护作用强度与EMIP相当。6．NDLIP对DM大鼠基础状态下的血清PAI-1含量和I／R前后t-PA的含量均无影响，但能降低I／R后血清PAI-1的增加程度，可能是其延迟心脏保护作用机制之一。其作用强度与EMIP相当。7．NDLIP能增加DM大鼠I／R后心肌磷酸腺苷含量，提高组织能荷，其作用强度与EMIP相当。