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植物多糖具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抑菌和免疫调节等生理作用,适当的化学修饰可增强或增加其生理活性。重楼(Paridis Rhizoma)因广泛的药理作用和显著的临床疗效而倍受关注。目前,重楼皂苷类成分的结构解析、分离鉴定及药理作用等方面的研究成为热点之一,有关重楼多糖的研究较少,其化学修饰尚未见报道。本实验研究,以秦巴山区优势中药材七叶一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara的干燥根茎为供试材料,制备重楼多糖(PPCP),采用苯酚–硫酸法对PPCP进行含量检测,同时对检测方法进行了优化及验证;重点开展了PPCP的乙酰化修饰和硫酸化修饰,在优化工艺下制备了乙酰化重楼多糖(A-PPCP)、硫酸化重楼多糖(S-PPCP),进而就PPCP,A-PPCP和S-PPCP体外抗氧化及清除NO2-的活性,进行了对比研究。主要研究内容及结果如下。(1)采用热水浸提法提取,经除蛋白、醇沉、透析分离纯化,制备PPCP;通过苯酚–硫酸法对PPCP进行含量测定,并建立了苯酚–硫酸法检测PPCP的优化条件:浓硫酸用量6.5 mL,苯酚用量2.0 mL,显色温度30℃,显色时间30min,样品考察量为0.2 mg。在上述条件下,PPCP的平均含量为91.3%,方法的平均回收率为97.8%,RSD为1.2%,检测结果准确性、稳定性高,检测方法可行。(2)着重开展了PPCP的乙酰化修饰和硫酸化修饰,并对相应修饰工艺进行了优化。以0.25 g PPCP为原料,通过响应面法优化重楼多糖乙酰化修饰的最佳工艺为:配料比7∶1(g∶g),反应温度25℃,反应时间30 min,在此工艺下,A-PPCP的乙酰基取代度均值为0.342。采用正交试验优化重楼多糖硫酸化修饰工艺,最佳条件为:浓硫酸与正丁醇配比3∶1(V∶V),反应温度0℃,反应时间1.0 h,该工艺下制备的S-PPCP取代度约为0.402。(3)通过紫外分光光度计和红外光谱仪,对优化工艺下制备的2种化学修饰多糖进行了光谱鉴定。以PPCP的光谱图为对照,根据A-PPCP,S-PPCP的紫外光谱吸收峰和红外光谱特征峰,结合相应取代度的测定结果,表明PPCP的乙酰化修饰和硫酸化修饰均取得成功。(4)通过体外清除DPPH·,·OH,O2-·和NO2-活性测定,考察了PPCP,A-PPCP,S-PPCP的体外抗氧化活性及清除NO2-活性。通过数据分析,与PPCP相比,A-PPCP,S-PPCP清除DPPH·活性的IC50值分别降低了34.62%和36.99%,清除·OH活性的IC50值分别降低了28.07%和23.00%,表明乙酰化修饰和硫酸化修饰均可有效提高PPCP体外清除DPPH·,·OH活性。A-PPCP清除O2-·,NO2-活性的IC50值较PPCP分别降低了9.32%、21.27%,表明乙酰化修饰可不同程度的增强PPCP清除O2-·,NO2-的活性。相反,S-PPCP清除O2-·,NO2-活性的IC50值较PPCP分别增大了13.79%,8.62%,表明硫酸化作用可引起PPCP的O2-·,NO2-清除活性的减弱。本研究,首次开展了重楼多糖的乙酰化和硫酸化修饰,并对其相应的修饰工艺进行了优化;进而开展了PPCP,A-PPCP和S-PPCP的体外抗氧化作用和清除NO2-作用的对比研究。此外,优化了苯酚–硫酸法检测重楼多糖的条件,所建方法准确性高、重现性好,可用于重楼多糖的检测。其研究结果,为重楼多糖的深入研究与开发利用,提供参考资料和科学依据。