针刺镇痛中内源性促肾上腺皮质激素释放激素的作用及机制探讨

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目的:观察电针(EA)夹脊穴对弗氏完全佐剂(CFA)诱发的炎症痛模型(AA)大鼠的镇痛治疗作用和神经内分泌免疫调节作用,探讨EA镇痛抗炎的作用机制;观察侧脑室注射抗5-羟色胺(5-HT)或抗β-内啡肽(β-EP)血清对内源性CRH在痛觉调制及EA镇痛作用的影响,以探讨内源性神经肽促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)在针刺镇痛及免疫调节作用中与内阿片肽、经典神经递质之间的作用关系;观察电针及侧脑室注射抗CRH血清对AA大鼠下丘脑抑制性G蛋白(inhibitory GTP-binding protein,Gi)表达的变化及EA镇痛的影响,以初步探讨针刺镇痛中内源性CRH的细胞信号转导机制。方法:以AA大鼠为研究对象,应用行为学痛阈观察、足跖容积测定、高效液相电化学法、放射免疫法等方法,观察EA夹脊穴和侧脑室注射抗CRH血清对AA大鼠痛阈、足跖容积、下丘脑和脊髓5-羟色胺(5-HT)、β-内啡肽(β-EP)含量、血清IL-1β和TNF-α水平的影响;应用免疫组化技术观察电针对AA大鼠下丘脑核转录因子NF-κB表达的影响及电针及侧脑室注射抗CRH血清对AA大鼠下丘脑室旁核CRH免疫阳性神经元表达的影响;观察侧脑室注射抗5-HT血清或抗β-EP血清对内源性CRH在AA大鼠及电针镇痛中的影响;用免疫印迹法观察电针夹脊穴及侧脑室注射抗CRH血清对AA大鼠下丘脑Gi蛋白表达的影响。结果:EA夹脊穴可提高AA大鼠痛阈,降低足跖容积,降低AA大鼠下丘脑核转录因子NF-κB的表达;侧脑室注射抗CRH血清可降低AA大鼠痛阈及EA镇痛效果,降低下丘脑5-HT和β-EP的含量,降低血清TNF-α水平,使AA大鼠及电针大鼠下丘脑CRH的表达减少,电针则增强下丘脑CRH的表达。侧脑室注射抗5-HT血清可增强抗CRH对痛觉调制及电针镇痛的影响,侧脑室注射抗β-EP血清可使下丘脑CRH表达增多,对抗CRH在电针镇痛中影响不大;EA可降低AA大鼠下丘脑Gi蛋白表达,侧脑室注射抗CRH血清则导致其含量升高。结论:电针镇痛及抗炎治疗作用可能与调节下丘脑活化的NF-κB的表达有关。电针镇痛及神经内分泌-免疫调节机制与G蛋白信号转导机制有关。内源性CRH在痛觉调制及针刺镇痛中的作用与5-HT及β-EP相关。内源性CRH在针刺镇痛及神经内分泌免疫调节中的作用与G蛋白信号转导机制有关。
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