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目的：探讨Ca2+拮抗剂尼莫地平(Nim)对肿瘤坏死因子-alpha(TNF-a)诱导鼠肺成纤维细胞增殖的影响,为尘肺发病机制的研究提供科学依据。方法：对SD大鼠乳鼠肺成纤维细胞进行原代培养和传代培养,传至4-5代后,用不同浓度TNF-α刺激成纤维细胞,培养一定时间,用Western blot技术检测成纤维细胞Gq蛋白的表达；用流式细胞技术检测成纤维细胞内Ca2+的含量。用TNF-α联合不同浓度的钙拮抗剂尼莫地平(Nim)刺激成纤维细胞,培养一定时间,用氯氨T法检测成纤维细胞羟脯氨酸的含量；用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定成纤维细胞内环-磷酸腺苷(cAMP)的含量；用荧光免疫组化技术检测成纤维细胞内蛋白激酶A(PKA)的表达。结果：1. Western blot结果显示：当不同浓度的TNF-α作用于鼠肺成纤维细胞时,在4h时间点,随着TNF-α剂量的增加,各实验组Gq蛋白的表达量也明显升高,且各组间差异均有显著性(P<0.05)。在24h时间点,各实验组Gq蛋白的表达量均较对照组显著增高(P<0.05)。20ng／ml TNF-α组Gq蛋白的表达量较10ng／ml和5ng/mlTNF-a组高,差异具有显著性(P<0.05)。10ng／ml和20ng/mlTNF-a组Gq蛋白的表达量较4h低,差异具有显著性(P<0.05)。2.细胞内游离Ca2+结果显示：当不同浓度的TNF-a作用于成纤维细胞时,各实验组荧光强度(F)值均较对照组明显增高(P<0.05),10ng／mlTNF-a组荧光强度(F)值较5ng／ml和20ng／mlTNF-a组高,差异具有显著性(P<0.05)。3.羟脯氨酸含量结果显示：在不同时间点,与空白对照组相比,各实验组羟脯氨酸含量均显著增高(P<0.05)。且随着作用时间的增加,羟脯氨酸含量显著增高(P＜0.05).40μmol/LNim+TNF-a组和80μmol/LNim+TNF-a组羟脯氨酸含量较单独TNF-a组低(P<0.05)。在4h时间点,TNF-a联合不同Nim组,随着Nim剂量的增加,各实验组羟脯氨酸含量降低,且各组间差异均有显著性(P<0.05)。在24h时间点,40μmol／LNim+TNF-α组羟脯氨酸含量较20μmol／L+NimTNF-a组低(P<0.05)。4.cAMP含量结果显示：在不同时间点,与空白对照组相比,各实验组cAMP的含量均显著增高(P<0.05)。40gmol／LNim+TNF-a组和TNF-a+80μmol／LNim组cAMP的含量较单独TNF-a组和TNF-a+20gmol／LNim组高,差异均具有显著性(P<0.05)。5.PKA结果显示：在4h时间点,40gmol／LNim+TNF-a组和80gmol／LNim+TNF-a平均光密度值较单独TNF-a组高,80μmol／LNim+TNF-a平均光密度值较20gmol／LNim+TNF-a组高,差异均具有显著性(P<0.05)。在24h时间点,80μmol／Lnim+TNF-a组平均光密度值较单独TNF-a组、20μmol／LNim+TNF-a组和40μmol／LNim+TNF-a组高,差异有显著性(P<0.05)。结论：1.TNF-a对鼠肺成纤维细胞Gq蛋白的表达和Ca2+的表达有促进作用,并可能通过Gq-Ca2+信号传导途径影响成纤维细胞的增殖。2.在TNF-a作用于鼠肺成纤维时,钙拮抗剂尼莫地平可以使羟脯氨酸的表达量降低,cAMP、PKA表达量增加,推测钙拮抗剂尼莫地平可能通过cAMP-PKA传导通路影响鼠肺成纤维细胞的增殖。