我国六省玉米中伏马菌素B1的污染水平调查

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目的伏马菌素(fumonisins,FB)是一组主要由镰刀菌产生的真菌毒素,其中FB1是污染玉米的主要成分,也是导致毒性作用的主要原因。FB1广泛存在于玉米及其制品中,对人类健康和畜牧业发展构成潜在威胁。研究证明FB1可引起马的脑白质软化病(equine leukoencephalomalacia,ELEM)和猪的肺水肿综合征(porcine pulmonary edema,PPE)。流行病学资料显示,人类膳食中FB1污染与食管癌高发有一定的关联。关于我国粮食中FB1的污染状况,目前国内尚未有全国性调查资料,国内外学者主要是对我国食管癌高发区、低发区以及局部地区玉米和玉米制品中FB1进行了对比研究。本课题对我国吉林、河南、湖北、广东、广西和四川六省玉米中FB1的污染状况进行调查,为我国制定玉米中FB1的限量标准,保护人民健康,促进国际贸易提供了基本的科学数据。方法一、样品的采取河南、湖北和广东各48份,四川和广西各47份,吉林45份,共283份样品。二、样品的处理、提取和净化研磨玉米样品使其90%可通过250μm~500μm网筛。参照国际分析化学家协会(AOAC)官方方法995.15“液相色阿谱法测定玉米中伏马菌素B1、B2和B3”,称取25g样品,加到250ml的塑料离心管中,加入50ml甲醇水溶液(3:1),振荡混合5min。离心混合液10min,3000r/min,用1mol/LNaOH调pH至5.8~6.5之间,过滤备用。固相提取柱纯化滤液:取5 ml甲醇预洗强阴离子交换柱(SPE),5 ml甲醇:水(3:1)过柱,取10 ml提取滤液,过SPE柱纯化毒素(速度≤2ml/min)。依次加入5 ml甲醇:水(3:1)、3 ml甲醇洗柱,不要让SPE柱变干,用10ml 1%冰醋酸甲醇液洗脱(≤1ml/min)。用20ml大试管收集洗脱液,吸取部分洗脱液到4ml容量瓶中,洗脱液用氮气60℃水浴吹干(注意氮气流速,使试管内液体未有大的波动)。用1ml甲醇溶解残留物并用该液补到4ml刻度线,注意冲刷瓶壁,使残留物完全溶解在甲醇中,蒸发至干以确保乙酸全部蒸发掉。干燥的样品残留物可在4℃下保存以备分析。分析前用邻苯二甲醛溶解,衍生。三、FB1高效液相色谱法的验证通过方法的检出限、回收率试验、盲样检测和精密度实验等对方法进行验证四、玉米提取物的分析结果本课题检测玉米中FB1的最低检出限为2ng/g,在20ng/ml、100ng/ml和500ng/ml水平的加标回收率范围为71.03%~100.44%,平均加标回收率在80%左右,与Sydenham等进行的国际协作研究结果相符,回收率的变异系数小于10%,按照本次实验操作要求回收率范围为60%~120%,变异系数<10%的规定,该实验方法灵敏、仪器稳定,实验结果准确可靠,重现性和再现性比较好,符合实验要求。各省玉米中FB1阳性率除河南为97.71%,其他五省均为100%。FB1的平均含量以四川最高,为19565.21ng/g,其他五省依次广西11261.40ng/g、广东4808.37ng/g、湖北2293.66ng/g、河南975.80ng/g、吉林901.85ng/g。根据中位数浓度六省玉米中FB1检出率由高到低分别为四川8176.94ng/g、广西5504.84ng/g、广东3733.76ng/g、湖北1006.01ng/g、吉林795.75ng/g和河南315.56ng/g。六省玉米中FB1的总平均含量为6633.11ng/g,总中位数浓度为2105.93ng/g,含量范围在2ng/g~71121.39ng/g之间。各省玉米中FB1平均含量经符号秩和检验(Wilcoxon法)两两分析显示,四川玉米中FB1的污染水平明显高于湖北(P<0.05)、吉林和河南(P<0.01);广西和广东明也明显高于吉林和河南(P<0.01)。结论我国玉米普遍受到FB1的污染,六省玉米中FB1的平均含量为6633.11ng/g,中位数浓度为2105.93ng/g,范围在2ng/g~71121.39ng/g之间;南北地区受到的污染程度严重不均,南方玉米中FB1含量比北方高。
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