miRNA是一段20-25 nt的内源性非编码RNA，它们在肌肉发育的过程中扮演了非常重要的调控角色。Bai3是促进成肌细胞融合的关键基因，DMD与杜氏肌营养不良症相关，ROCK1可以促进细胞的增殖与迁移。我们通过双荧光技术验证Bai3、ROCK1、DMD是否是miR-340-5p的靶基因，再通过qRT-PCR与Western Blot技术检测miR-340-5p对Bai3、 DMD、ROCK1的影响，结合免疫荧光、xCELLigence系统、细胞划痕等实验技术，探究miR-340-5p对成肌细胞融合、增殖与迁移的调控作用。主要研究结果如下:　　1.通过生物信息学分析，发现miR-340-5p在包括人类、小鼠、大鼠以及猪等多类物种中序列完全一致，表明miR-340-5p在物种间具有高度的保守性。通过预测网站筛选出miR-340-5p的三个潜在靶基因，Bai3、DMD、ROCK1，并且其结合部位在物种间也具有高度保守性;　　2.构建Bai33UTR双荧光素酶报告系统重组质粒，与miR-340-5p共转染入BHK细胞，发现miR-340-5p可以使野生型重组质粒的荧光活性显著降低，突变型重组质粒的荧光活性则未受影响，证明miR-340-5p可以与Bai33UTR预测位点相结合;分化表达谱定量结果表明Bai3表达量在C2C12分化第五天时达到最高，通过对C2C12分别转染miR-340-5p mimics和inhibitor后分化处理五天，进行qRT-PCR以及Western Blot检测，结果显示mimics和inhibitor对Bai3 mRNA无显著影响，而mimics可以显著降低Bai3的蛋白表达，证明Bai3是miR-340-5p的靶基因;免疫荧光结果显示，转染miR-340-5p mimics后，成肌细胞的融合受到了显著抑制，表明miR-340-5p可以通过靶向Bai3对成肌细胞融合具有抑制作用;　　3.构建ROCK13UTR双荧光素酶报告系统重组质粒，与miR-340-5p共转染入BHK细胞，发现miR-340-5p可以使野生型重组质粒的荧光活性显著降低，突变型重组质粒的荧光活性则未受影响，证明miR-340-5p可以与ROCK13UTR预测位点相结合;通过对C2C12分别转染miR-340-5p mimics和inhibitor后增殖培养24小时，再进行qRT-PCR以及Westem Blot检测，结果显示mimics和inhibitor对ROCK1mRNA无显著影响，而mimics可以显著降低ROCK1的蛋白表达，证明ROCK1是miR-340-5p的靶基因;细胞增殖实验和细胞划痕实验结果显示miR-340-5p能够通过靶向ROCK1有效抑制成肌细胞的增殖与迁移;　　4.DMD分化表达结果显示其mRNA表达量随着分化的进行逐渐增高。对C2C12分别转染miR-340-5p mimics以及inhibitor后分化处理五天，再进行qRT-PCR验证以及Western Blot检测，结果显示mimics和inhibitor对DMD mRNA无显著影响，而蛋白表达结果显示mimics可以显著降低DMD的蛋白表达，证明DMD是miR-340-5p的靶基因。