本文选用唐代孙思邈《千金方》中收载药方[1]:生地黄汤为对象,研究了方中的君药生地黄的药效物质基础,并对由此基础发展而来的海绵剂进行了制备工艺、质量评价等方面的研究。目的初步筛选生地黄止血作用的药效物质基础。研究生地黄止血有效部位HPLC指纹图谱。优选生地黄的提取工艺,筛选出最佳工艺参数。筛选生地黄止血海绵剂的最佳制备工艺。建立生地黄止血海绵剂的质量标准。方法采用经典的系统溶剂法(极性由小到大:石油醚-乙酸乙酯-正丁醇-乙醇)提取生地黄水煎液,用剪尾法和毛细玻管法测定出、凝血时间,比较各部位的止血作用;将筛选出的有效部位用大孔吸附树脂进行分离纯化,用不同浓度乙醇进行梯度洗脱,用剪尾法和毛细玻管法测定出、凝血时间,比较各洗脱部位的止血作用。采用高效液相色谱法,Akasil-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,检测波长为210nm,流速1.0ml/min,柱温30℃。确定了生地黄止血有效部位的10批指纹图谱共有模式,进行了相似度比较。以样品中多糖含量、各指纹峰相对于梓醇含量的加和作为评价指标,考察药材浸泡时间,加水量,提取时间等因素对生地黄提取工艺的影响。采用单因素实验法,以外观质量、吸水力为评价指标,考察海绵剂的辅料种类、药物与明胶比例2个因素对海绵剂成型性的影响。采用薄层色谱法对止血海绵中生地黄进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定了各指纹峰相对于梓醇的含量;采用紫外分光光度法测定止血海绵中多糖含量。结果乙醇部位可明显缩短小鼠的出、凝血时间;水洗脱液、30%乙醇洗脱液、80%乙醇洗脱液均能缩短小鼠的出、凝血时间,水洗脱液剂量与止血作用有明显的正相关性,30%乙醇洗脱液量效关系不明显,80%乙醇洗脱液止血作用量效关系呈现负相关性。确定了生地黄止血有效部位的10批指纹图谱共有模式,进行了相似度比较。最佳提取工艺为:药材用12倍量水,浸泡15min,提取时间为1.5h,提取3次。海绵剂的辅料选用明胶、吐温-80,药物与明胶比例为1:1。定性鉴别薄层色谱斑点清晰;葡萄糖在0.0067～0.067mg/ml呈良好线性关系;梓醇在0.13～2.6μg.呈良好线性关系。结论生地黄止血作用的药效活性物质大多存在于乙醇部位,其止血作用的活性成分与糖类、环烯醚萜苷类有关。所建立的方法可用于生地黄止血有效部位指纹图谱测定,并可对其制剂的质量评价提供科学依据。该提取工艺参数客观可行、稳定合理,可为工业化生产提供实验依据。通过指标考察,制备工艺合理可行,成品质量基本稳定。建立生地黄止血海绵剂的质量标准所用方法简便、准确、可靠,可作为生地黄止血海绵剂的质量控制方法。