【摘 要】
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Zwittermicin A(ZwA)是由蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus,Bc)和苏云金杆菌产生的一种新型广谱的抗生素,是已知唯一的线性氨基多元醇类抗生素,该抗生素对多种真核微生物和原核
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Zwittermicin A(ZwA)是由蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus,Bc)和苏云金杆菌产生的一种新型广谱的抗生素,是已知唯一的线性氨基多元醇类抗生素,该抗生素对多种真核微生物和原核微生物有抑制作用,对苏云金杆菌杀虫晶体蛋白CrylAc的杀虫活性具有增效作用,但作用机理尚不清楚。本研究分别从组织病理学、分子生物学及生物化学角度对ZwA的增效机理进行了初步研究。首先利用等电点沉淀法提取CrylAc蛋白,通过ZwA与CrylAc蛋白分别和共同饲喂甜菜夜蛾幼虫(Spodoptera exigua Hübner,S.exigua),证明了ZwA的杀虫增效活性。用CrylAc蛋白单独饲喂甜菜夜蛾初孵幼虫,体重抑制活性明显,杀虫活性较低;单独用ZwA处理时无杀虫活性。当ZwA浓度为0.1mg/mL、CrylAc浓度为1 mg/mL时,48 h校正死亡率达90%。对甜菜夜蛾五龄幼虫进行生物测定,当用25μg ZwA和5μgCrylAc分别饲喂试虫时,无杀虫活性;用25μg ZwA和5μg CrylAc同时饲喂试虫时,84h试虫全部死亡。对甜菜夜蛾五龄幼虫中肠组织切片分析发现,幼虫口服25μg ZwA和5μg CrylAc的幼虫12h时,中肠变细小,中肠壁变厚,且有裂解现象,围食膜无法正常形成;24h和36h时中肠壁逐渐恢复正常,围食膜重新形成,食物量增多。体外条件下,用等量的1%ZwA和1%几丁质亲和分子(Calcofluor)分别处理甜菜夜蛾围食膜,Calcofluor可以明显促进围食膜蛋白从围食膜几丁质原纤丝上解离下来,而ZwA无此作用。通过BAEE法测定ZwA对Trypsin活力的影响,结果表明ZwA对Trypsin活力无影响,并且ZwA对Trypsin活化CrylAc蛋白的过程也无影响。初步推测,ZwA的作用位点应位于甜菜夜蛾幼虫的中肠壁上。
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