白芍木瓜汤防治大鼠骨性关节炎的实验研究

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目的:建立骨性关节炎大鼠模型,用白芍木瓜汤治疗干预,观察白芍木瓜汤对OA大鼠一般情况、体重、抓力、影像学和病理学表现的影响,验证白芍木瓜汤对OA大鼠防治作用,并探讨其对骨性关节炎的可能作用机制。方法:清洁级雄性SD大鼠,共50只,将其随机分成5组:正常对照组(A组)、模型对照组(B组)、阳性对照组(C组)、白芍木瓜汤高剂量组(D组)、白芍木瓜汤低剂量组(E组),每组10只。其中正常对照组不予任何处理,其余4组大鼠均采用双侧膝关节腔内注射碘乙酸法,成功建立OA大鼠模型。术后第二天,A、B组给予生理盐水灌胃,C组给予布洛芬灌胃,D、E两组采用不同剂量的中药汤剂灌胃,持续灌胃6周,在此期间,每周称量各组大鼠的体重及测定其抓力程度。至第6周末,对各组大鼠行腹腔麻醉,用X-ray影像观察膝关节结构与状态;心脏采血,并分离血清,用酶联免疫(Elisa)法测定各组大鼠的血清中基质金属蛋白酶13(MMP-13)、软骨蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)含量;并截取膝关节,剔除皮肤与肌肉,EDTA脱钙后分别进行HE染色与SO染色,光镜下观察各组大鼠膝关节病理变化。结果:(1)体重:造模成功后,B组的大鼠体重相对于A组,始终存在显著性差异(P<0.01),随着给药时间的增加,白芍木瓜汤可以改善大鼠食欲,使大鼠体重增加。(2)抓力测定:各治疗组的大鼠抓力水平始终无明显差异(P>0.05)。(3)膝关节影像:造模成功后,相对于A组,B组大鼠的双膝关节破坏严重,干预治疗6周后,C、D、E组大鼠双膝关节的影像学表现均明显改善,以D组的改善情况最为明显。(4)膝关节病理:造模成功后,相比于A组,B组的大鼠双膝关节破坏程度高;干预治疗6周后,相比于B组,C、D、E组膝关节软骨的病理学均明显改善,以D组的改善情况最为明显。(5)血清含量:造模成功后,相对于A组,B组大鼠血清中的MMP-13含量呈显著性升高(P<0.01),Col-Ⅱ、Aggrecan含量呈显著性降低(P<0.01);药物治疗6周后,相比于B组,C、D、E组大鼠血清中的MMP-13含量均呈显著性降低(P<0.01),血清Col-Ⅱ、Aggrecan含量均呈显著性升高(P<0.01)。结论:白芍木瓜汤对碘乙酸诱导的大鼠骨性关节炎有良好的药效作用,其作用机制可能与抑制MMP-13产生,促进Aggrecan、Col Ⅱ合成,从而达到修复软骨有关。
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