基于荧光质子转移与能量转移的新型化学生物传感器的研究

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化学传感器已广泛应用于临床诊断、生物分析、环境监测等领域,提高化学传感器的选择性一直是化学传感技术研究领域要致力解决的重要问题,荧光化学传感器由于具有高选择性、高灵敏度、低制作成本、不破坏样品和易于实现在线检测等特点而具有很广泛的应用前景,因而吸引了众多研究者的兴趣。寻找新的具有高选择性的荧光分子识别载体已成为现代分析化学中的一大前沿课题。含2-(2’-羟苯基)结构的苯并噁唑类、苯并噻唑类和喹唑啉酮类等化合物,是典型的能发生激发态分子内质子转移(ESIPT)反应的荧光分子。该类型的化合物具有荧光量子产率高, Stokes位移较大和光稳定性好的优点。它们一旦与某些金属离子选择性结合后,就有可能影响其ESIPT的行为,从而引起荧光信号的改变。因此该系列化合物可用于研究基于激发态分子内质子转移原理的荧光分子传感器。另一方面,由于抗原抗体间的免疫反应更是具专一性、高选择性的一类反应,所以为了提高传感器的选择性,很多致力于化学分析的研究者,现在已经逐步的向生物领域渗透,把化学与生物结合起来,兴起了一门化学生物传感器的新研究领域。例如,通过抗原抗体的免疫结合,把标记在抗原和抗体上的化合物连接起来,形成一个超大分子,再根据形成大分子的过程中,标记在抗原和抗体上的化合物发生能量的变化,得到制备化学生物传感器的分析信号。鉴于以上所述,本论文工作大体可分为两部分,第一部分工作是对激发态分子内质子转移型荧光化学传感器的研究,具体内容如下:(1)研制了基于2-(2′-羟基苯基)苯并噁唑(HPBO)PVC膜的高选择性Cu2+荧光传感器,考察了光极膜组分配比对光极的响应性能的影响,得出最佳响应特性的光极膜敏感物的膜组成为2% HPBO、5% NaTPB、62% DOS和31% PVC (w/w)。考察了常见阴离子和金属阳离子对检测Cu2+的干扰,该传感器的线性响应范围为4.0×10?8 M--5.0×10?5 M, pH工作范围为4.0-6.5,将传感器用于实际样品中Cu2+的分析,结果令人满意。(2)合成了2-(2′, 5′-二羟基苯基)-4(3H)-喹唑啉酮(DHPQ)化合物,并将其用作Hg2+荧光分子传感器的荧光载体,将其响应性能与2-(2′-羟基苯基)-4(3H)-喹唑啉酮(HPQ),2-(2′-羟基-5′-甲基苯基)-4(3H)-喹唑啉酮(MeHPQ)进行了对比,DHPQ对Hg2+的响应最好,可能是由于DHPQ上有两个羟基基团,其供电子效应更有利于带孤对电子的N原子与Hg2+的结合。传感器对Hg2+的线性响应范围为8×10–7 M--2×10–4 M。第二部分工作是基于荧光共振能量转移型生物免疫传感器的研究。结合纳米粒子包壳技术和应用免疫反应的原理,得到了基于CdTe量子点与罗丹明B核壳纳米粒子共振能量转移的人IgG荧光免疫分析。合成了一系列尺寸的CdTe量子点,选取发射波长与罗丹明B激发波长相近的CdTe量子点,使得罗丹明B核壳型纳米粒子与CdTe量子点之间发生了荧光共振能量转移,得到了分析信号。人IgG浓度在13.5-0.04μg/ml的范围内与传感器的荧光强度呈良好的线性关系。
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