下丘脑GnRH及其受体信号通路AC/PKA分子在针刺调节他莫昔芬引发潮热中的作用

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目的本研究观察针刺对他莫昔芬引发潮热模型大鼠下丘脑GnRH及其受体信号通路AC/PKA分子的影响,探讨针刺改善乳腺癌术后内分泌治疗药物他莫昔芬引发潮热的中枢部分作用机理。方法选用42只清洁级SD雌性大鼠,经过基础体温筛选,合格的36只大鼠随机分为对照组(12只)、造模组(24只)。以他莫昔芬灌胃建立潮热模型,造模成功后将造模组24只大鼠随机分为模型组(12只)、针刺组(12只)。针刺组选取“三阴交”、“关元”、“太冲”进行手法运针干预,以平补平泻的行针手法,每10 min捻转行针1次,每次行针1 min,针刺干预30 min,“三阴交”和“太冲”穴左右轮换,隔日一次,共治疗10次,持续20天。运用热电偶测温仪连续4小时测定大鼠尾根部皮肤温度,利用酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)测定大鼠血清雌二醇(Estradiol,E2)的含量、下丘脑促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)及其受体(GnRHR)的水平,以实时荧光定量法(Real-time Quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测大鼠下丘脑腺苷酸环化酶(Adenylate cyclase,AC)以及蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)的基因表达。结果1、针刺对他莫昔芬引发潮热模型大鼠尾温的改善效应(1)他莫昔芬给药28天后,造模组鼠尾温度明显高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05),说明造模成功;(2)针刺治疗20天后,针刺组尾温明显低于模型组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。2、针刺对他莫昔芬引发潮热模型大鼠血清E2含量的影响与对照组比较,模型组血清E2的含量有所降低,而针刺组血清E2含量高于模型组,且趋近对照组,但各组间没有统计学差异(P>0.05)。3、针刺对他莫昔芬引发潮热模型大鼠下丘脑GnRH及其受体信号通路AC/PKA分子的调节(1)下丘脑GnRH浓度:模型组GnRH浓度较对照组升高(P<0.05),针刺组GnRH浓度较模型组下降明显(P<0.05);(2)下丘脑GnRHR浓度:模型组与对照组相比,下丘脑GnRHR浓度升高,但无统计学差异(P>0.05);针刺组的GnRHR浓度明显低于模型组(P<0.05);(3)下丘脑AC基因表达:AC基因表达水平模型组高于对照组、针刺组低于模型组和对照组,但各组间没有统计学差异(P>0.05);(4)下丘脑PKA基因表达:模型组的PKA基因表达水平高于对照组、针刺组PKA基因表达水平接近对照组,但各组间没有统计学差异(P>0.05)。结论1.针刺能有效改善他莫昔芬引发的潮热,并在一定范围内能提高潮热大鼠雌激素含量;2.针刺可能通过调节下丘脑GnRH及其受体水平,影响信号通路相关分子的表达,从而达到改善他莫昔芬引发的潮热的目的。
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