背景：　　目前，越来越多的实验研究表明LR-MSCs与肺纤维化等肺部疾病的修复和发生发展密切相关。也有研究发现，该细胞群体具有向上皮细胞或成纤维细胞分化的双向分化潜能，进而参与了肺损伤的修复和肺纤维化过程。因此，体外研究LR-MSCs的分化机制具有非常重要的意义。然而，体外尚无有效的分离纯化LR-MSCs的方法。鉴于此，本实验首先分离纯化并鉴定了LR-MSCs;然后运用trans-well技术构建了LR-MSCs与肺泡二型上皮细胞(ATⅡ细胞)共培养诱导分化体系。这将为探讨LR-MSCs分化调控的具体分子机制提供重要的实验基础。　　目的：　　1、体外分离纯化鉴定LR-MSCs;　　2、体外构建LR-MSCs与ATⅡ细胞共培养诱导分化体系，诱导LR-MSCs向ATⅡ细胞分化。　　方法：　　1、取5只C57BL/6小鼠的肺，用dispease酶和胶原酶进行消化以制备单细胞悬液，首先预培养全肺细胞，然后用流式细胞仪FACS AriaI分选出表型为Sca-1+CD45-CD31-的细胞群，分选后的细胞用含有15％FBS的低糖DMEM培养基进行培养。　　2、结合骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)的特性，通过运用流式鉴定表面标记的表达、RT-PCR检测谱系表达模式、细胞周期检测DNA含量等方法来对Sca-1+CD45-CD31-细胞群进行鉴定。　　3、通过trans-well方法建立LR-MSCs与ATⅡ细胞的共培养体系。将两种细胞以1:1比例混匀接种到套皿内，在连续共培养7d、14d的时候，用免疫荧光方法检测诱导分化的LR-MSCs关于上皮细胞标记CK18、CK19、Occludin、SP-C的表达情况。　　结果：　　1、采用流式分选技术，成功分选出表型为Sca-1+CD45-CD31-的细胞群;体外培养时表现为长梭形、旋涡状等干细胞特性;　　2、Sca-1+CD45-CD31-细胞群具有BM-MSCs样特性。两者具有相同的表型，都表达Sca-1、CD29、CD90、CD44和CD106，不表达CD31和CD45;具有相同的谱系表达模式，即高表达间质细胞谱系的标记，弱表达内皮细胞谱系和上皮细胞谱系的标记;具有相似的DNA信息。因此，我们确认Sca-1+CD45-CD31-细胞群为LR-MSCs。　　3、运用trans-well技术成功建立了LR-MSCs与ATⅡ细胞共培养诱导体系。在共培养体系中，部分LR-MSCs呈现出上皮样形态，由典型的长梭形变为圆形、铺路石状，并且表达上皮细胞特异性标记CK18、CK19、Occludin、SP-C。　　结论：　　在本实验中，成功地分离纯化并鉴定了LR-MSCs;同时运用trans-well技术构建了LR-MSCs向ATⅡ细胞共培养诱导分化体系，成功地诱导了LR-MSCs向ATⅡ细胞分化。这对于进一步研究LR-MSCs的分化机制具有重要意义。