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结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染机体后,宿主细胞的天然免疫应答状态在结核病的发病过程中扮演着至关重要的作用。近年来,越来越多的研究发现TRIM蛋白家族在天然免疫应答中具有重要的调控作用。此外,TRIM蛋白家族的异常表达可以参与多种疾病的致病过程,如病毒感染性疾病,肿瘤,免疫性疾病以及神经退行性疾病等。然而TRIM蛋白家族在结核病中的研究较少。本研究首先采用荧光定量PCR的方法对活动性结核病患者、潜伏感染者以及健康对照者中的70多个TRIM基因的mRNA水平进行了全面系统地分析,结果显示20个TRIM基因在活动性结核病患者中的表达量明显低于潜伏感染者和健康对照者。后续我们通过体外细胞感染实验进一步验证了差异较大TRIM基因(TRIM4、TRIM16、TRIM27、TRIM32、TRIM35、TRIM46、TRIM47、TRIM65和TRIM68)的表达变化,并发现这些TRIM基因的mRNA表达量与初始荷菌量和感染时间密切相关。此外,我们选取TRIM65基因构建过表达重组载体,初步分析了TRIM65基因在巨噬细胞抗Mtb感染中的调控作用。结果显示RAW264.7细胞感染Mtb模式菌株耻垢分枝杆菌后,TRIM65基因的高表达能够提高IL-6基因的mRNA表达量,却降低IL-12基因的mRNA表达量;而RAW264.7细胞感染Mtb H37Rv后,TRIM65基因的高表达同样可以提高IL-6基因的mRNA表达量,但降低了iNOS2基因的mRNA表达量,由此可见,TRIM65基因在巨噬细胞抗Mtb感染中的调控作用是相对复杂的,且不同毒力、不同生长速度的Mtb可能影响TRIM65基因的调控作用,但具体作用机制还需要进一步地深入研究。结核病的主要传染源是排菌的活动性结核病患者,该病主要通过呼吸道进行传播,目前全世界已有三分之一的人口感染了Mtb,由此可见结核病的传播效率非常高。因此准确、及时的诊断出活动性结核病患者,尽早地给予治疗,便可有效降低结核病的传播。目前结核病的诊断方法较多,但每种方法均存在一定的缺陷,因此筛选新的诊断标志物显得尤为迫切。本研究从两个方面进行了结核病诊断标志物的筛选,一是从宿主的TRIM蛋白的角度出发,我们扩大了临床样本量,通过荧光定量PCR方法检测外周血细胞中9个TRIM基因(TRIM4、TRIM16、TRIM27、TRIM32、TRIM35、TRIM46、TRIM47、TRIM65和TRIM68)的mRNA表达量。受试者操作曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC)分析显示9个TRIM基因在区分活动性结核病和潜伏感染或健康对照时均具有较好地诊断效果,其中,TRIM4和TRIM27在鉴别活动性结核病和健康对照时诊断效果最好,敏感度和特异度均达到100%;在鉴别活动性结核病和潜伏感染时,TRIM4和TRIM65诊断效果最好,敏感度和特异度均达到100%;然而单个TRIM基因在鉴别潜伏感染和健康对照时,诊断效果一般,但TRIM基因的联合应用可在一定程度上改善诊断效果。二是从血清抗体的角度出发,我们采用Mtb蛋白芯片欲从系统水平上筛选鉴别活动性结核病的血清标志物,结果显示众多抗原特异性IgG和IgM抗体的响应水平在活动性结核病患者和健康对照者间具有明显差异。后续我们选取能够同时对IgG和IgM抗体响应的Rv2026c和Rv2421c抗原,通过扩大样本量进行ELISA验证,结果显示Rv2026c和Rv2421c抗原特异性IgG水平以及Rv2421c抗原特异性IgM水平在活动性结核病患者中明显高于健康对照,ROC分析证实这些抗原特异性抗体均具有一定的诊断效果。此外,二元逻辑回归分析建立的抗原联合回归模型可以明显提高诊断活动性结核病的效果,其敏感度和特异度分别为82.5%和88.12%,为建立诊断结核病的新方法提供了参考。