本研究在传统中医理论的基础上,结合现代医学研究成果对“心主血脉”、“气血相关”进行了从宏观到微观新的诠释。认为“心主血脉”体现了心血管系统中的心脏泵血的机械作用和血管调节功能以及心血管系统对机体的整体调节作用,“气血相关”体现了神经内分泌对心血管系统的综合调控作用。因此指出“血脉”病变是心血管系统自身和神经内分泌网络调控失常所致,应从“心”和“气”着手进行综合调治。笔者以肢体动脉硬化闭塞症(ASO)为例,运用上述理论分析其病因病机以确立治则治法。通过“温脉通”治疗 ASO 的实验研究以方示理,进一步证实“血脉”病变与“心”和“气”的相关性,以及从“心”和“气”治疗 ASO 的合理性。 温脉通是陈淑长教授治疗早期 ASO 的有效方剂,由桂枝、黄芪、当归、川芎等组成,具有温阳益气、活血通脉作用。本实验研究应用多种检测手段和方法从整体器官水平和细胞分子水平探讨了该方防治 ASO、抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移作用及其机制。 整体动物实验分为正常对照组、ASO 模型组、温脉通治疗组。主要观察温脉通对实验性 ASO 家兔的治疗作用,并初步探讨其作用机理。 体外细胞实验则以体外培养的兔主动脉 VSMC 为研究对象,应用血清药理学研究方法,以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)为诱导因素,随机将生长良好的第 4～5 代 VSMC 分为正常对照组、AngⅡ组、温脉通高剂量组、温脉通低剂量组、温阳益气拆方组、活血通脉拆方组。从对细胞数量、细胞周期、细胞代谢产物、细胞因子蛋白表达等方面进行检测,观察温脉通对 VSMC 增殖、迁移及相关因素的影响,以阐明该方防治 ASO 的细胞生物学基础。并通过温脉通全方与温阳益气拆方和活血通脉拆方的比较,证明其立法组方的科学性、合理性。 实验结果如下: 1.温脉通具有抗家兔实验性 ASO 的作用,此作用与抑制 VSMC 增殖、诱导 VSMC 凋亡有关。 形态学检查显示,ASO 家兔动脉管腔狭窄,内膜增厚,中膜 VSMC 明显增殖,排列紊乱,部分迁移至内膜;温脉通组血管内膜表面光滑,中膜无明显增厚,VSMC 排列整齐,血管壁较模型组明显变薄。治疗组细胞增殖核抗原(PCNA)阳性细胞数明显低于正常组和模型组,而凋亡细胞数高于两组。表明该方通过调整细胞增殖速率与凋亡速率之间的动态平衡,减少内膜过度增生,减缓 AS 进程,从而发挥防治 ASO 作用。 2.温脉通具有抑制 AngⅡ诱导 VSMC 增殖和迁移的作用 MTT 法观察证实,治疗组呈剂量依赖性地抑制 AngⅡ诱导的 VSMC 增殖,而且全方较拆方明显。通过显微镜下测微尺测量观察到温脉通具有对抗 AngⅡ促 VSMC 迁移作用,以 48 h 作用明显。 3.温脉通抑制 VSMC 增殖作用与调控细胞周期及表型转化有关 应用流式细胞仪及免疫组化染色技术检测发现AngⅡ可增加细胞周期中S期、G2/M期